[发明专利]用于早期乳腺癌症诊断的微小核糖核酸

说明书

本发明属于生物技术领域，涉及早期乳腺癌标记物及其检测治疗方法，本发明基于多种微小核糖核酸在早期乳腺癌细胞中的表达强度差异开发出可用于早期乳腺癌分子诊断和治疗的生物小分子。本发明的早期乳腺癌标记物具有检出谱系广、灵敏度高、特异性好、检测成本低、取材方便、样本易存放等优点，该方法可广泛用于乳腺癌早期普查和预后等相关工作，改进单一的标记物或目前临床广泛应用的生物标记物本身的不稳定性所难以克服的个体差异、所带来的低特异性和低灵敏度，显著提高早期乳腺癌不同亚型的临床检出率、降低对乳腺癌误诊率和漏诊率，成为早期乳腺癌诊断和个性化治疗的有效手段。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及人体体液中微小核糖核酸在早期乳腺癌中早期筛查及精准用药检测方法。

背景技术

微小核糖核酸

本文所述的发明是基于以下观察：某些微小核糖核酸(miRNAs)将改变雌激素受体阿尔法66 型和雌激素受体阿尔法36在细胞内的表达。正如本文所述，本项目发明人发现，某些细胞对汤吗希芬抗性会被改变，使得其对汤吗希芬的治疗更为敏感.特别是，发明人发现，微小核糖核酸let-7等在某些细胞内能显著抑制雌激素受体阿尔法66及阿尔法36的表达，从而增加这些细胞对汤吗希芬治疗的灵敏度。

本发明包括多聚核苷酸及其使用。本文中所使用的术语“多聚核苷酸”是指任何长度的核苷酸聚合形式，无论是核糖核苷酸，脱氧核糖核苷酸，由肽链演变而来的核苷酸链分子，或兼而有之，既包括单链分子，双链复式单位。多聚核苷酸获得包括直接来自天然来源，或通过分子重组技术、酶学反应修饰、或化学技术等技术获得。本发明的多聚核苷酸可以通过分离提取获得。分离提取多聚核苷酸指的是从其自然环境中挪去。而由基因重组，酶学反应技术或化学方法生产的多核苷酸指指的是定义上的分离与纯化，因为他们从来没有在自然环境中存在过。此处使用的“基因”是指一种核苷酸序列，编码mRNA或未转录加工过的RNA[例如，一个RNA分子，包括外显子和内含子及转录加工后产生的信使核糖核苷酸(mRNA)，或转录加工后的原型态微小核糖核酸(Pri-miRNA)]。基因在其5′端有转录起始位点，在其3’端有转录终止的信号。本文所用的“目标基因”，是指一个特定的基因，其表达会被本发明中多聚核苷酸抑制。本文所用的“目标mRNA”是由目标基因编码的mRNA。

除非另有说明，目标基因可导致多个完全不同的mRNA，而这些mRNA的产生是由于使用了多种不同组合的外显子。这些相关的mRNA被称为剪接变异体或基因转录的变体。

本发明的多聚核苷酸可称为有意义链。有意义链一般由17到30个核苷酸组成，例如17，18， 19，20，21，22，23，24，25，26，27，28，29或30个核苷酸。有意义链与目标mRNA序列一样，或者完全相同。本文中所使用的术语“相同”是指有意义链的核苷酸序列具有相同的多聚核苷酸的一个部分，如目标mRNA的核苷酸序列。本文中所使用的术语“实质上相同”是指有意义链序列与目标mRNA序列有一个或多个不同，如1，2，3，4，5，6，7，8，9，10或11个核苷酸，其余核苷酸序列与目标mRNA是相同的。