[发明专利]基于模拟酶标记银纳米粒子的高灵敏化学发光免疫分析方法

权利要求书

1.一种高灵敏化学发光成像免疫分析方法。其特征在于该分析方法由可抛式免疫传感芯片(1)、模拟酶标记银纳米粒子探针(2)和信号产生体系(3)构成。其中(1)是在醛基基片上构建4×12阵列，在每个传感池内化学包被捕捉抗体Ab1，制得可捕捉目标抗原的传感芯片；(2)是在银纳米粒子表面同时修饰信号抗体Ab2和结合了血红素的G-四链体DNA(即模拟酶)制成；(3)是利用模拟酶的过氧化物酶特性催化过氧化氢氧化鲁米诺的反应，产生强化学发光信号。

2.根据权利要求1所述的免疫分析方法，其特征在于所述的免疫传感芯片是通过手工贴膜技术在醛基基片上获得4×12阵列，其后在每个传感池内包被捕捉抗体Ab1制成。

3.根据权利要求1所述的免疫分析方法，其特征在于所述的模拟酶标记银纳米粒子探针，是通过在银纳米粒子表面同时修饰信号抗体Ab2和高比例G-四链体DNA，并利用G-四链体DNA与血红素结合形成模拟酶而制成。

4.根据权利要求1所述的免疫分析方法，其特征在于所述的模拟酶标记银纳米粒子探针具有过氧化物酶特性，可催化化学发光底物过氧化氢氧化鲁米诺的反应，获得强化学发光信号。

5.根据权利要求1所述的免疫分析方法，其特征在于所述的模拟酶标记银纳米粒子探针含有信号抗体Ab2，可通过夹心免疫反应将探针结合到传感阵列上，从而进行高灵敏化学发光成像免疫分析，其具体分析步骤如下：

(1)在可抛式免疫传感芯片的每个传感池表面滴加标准溶液或待检测样品，进行温育；

(2)冲洗后，在每个传感池表面滴加模拟酶标记银纳米粒子探针，反应结束后冲洗；

(3)在每个传感池表面滴加化学发光底物，通过电感耦合装置CCD相机进行化学发光成像检测；

(4)利用标准溶液获得工作曲线，求出待测样品中目标蛋白质(抗原)的浓度。

6.根据权利要求5所述的免疫分析方法，其特征在于传感阵列的48个传感池可分别滴加48个不同样品，同时检测48种不同样品中的目标蛋白质浓度。

7.根据权利要求5所述的免疫分析方法，其特征在于冲洗液为含0.05％吐温-20的0.01M磷酸盐缓冲液，pH7.4。