[发明专利]一种基于快速克隆技术的环状RNA表达载体构建方法及其应用有效
申请号: | 201710215532.0 | 申请日: | 2017-04-04 |
公开(公告)号: | CN107058360B | 公开(公告)日: | 2019-03-01 |
发明(设计)人: | 杨展 | 申请(专利权)人: | 河北医科大学第二医院 |
主分类号: | C12N15/66 | 分类号: | C12N15/66 |
代理公司: | 河北东尚律师事务所 13124 | 代理人: | 李国聪 |
地址: | 050000 河*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 快速 克隆技术 环状 rna 表达 载体 构建 方法 及其 应用 | ||
1.一种基于快速克隆技术的环状RNA表达载体构建方法,其特征在于,该构建方法采用特定序列的序列框架以及酶切位点经过一步克隆法得到完整无多余碱基序列的环状RNA;
所述特定序列的序列框架包括上游特异性序列框架SEQ ID NUMBER.3、下游特异性序列框架SEQ ID NUMBER.4;
其中,所述上游特异性序列框架SEQ ID NUMBER.3:
CGGGCGCGGTGCCTCACGCCTGTAATCCCAGCACTTTGGGAGCCTGGGGCACTCTGACCATTCCCTTTCTTTCCCTCAGCTAGG;
所述下游特异性序列框架SEQ ID NUMBER.4:
CACGTGAGTATCAACTGCAGACGTTTCGTGCGGCGCCCCAGGCTCCCAAAGTGCTGGGATTACAGGCGTGAGGCACCGCGCCCG;
所述酶切位点为EcoN1_CUT:CCTCAGCTAGG与Pml1_CUT:CACGTG。
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