[发明专利]利用喜树悬浮细胞生产N1 有效
申请号: | 201710205013.6 | 申请日: | 2017-03-31 |
公开(公告)号: | CN106995828B | 公开(公告)日: | 2020-10-09 |
发明(设计)人: | 罗应刚;蒲祥;杨云;屈细兴;陈菲;张国林 | 申请(专利权)人: | 中国科学院成都生物研究所 |
主分类号: | C12P13/02 | 分类号: | C12P13/02 |
代理公司: | 成都赛恩斯知识产权代理事务所(普通合伙) 51212 | 代理人: | 高利丹 |
地址: | 610041 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 利用 喜树 悬浮 细胞 生产 base sup | ||
1.利用喜树悬浮细胞生产N1-乙酰犬尿胺的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将喜树悬浮细胞接种到以MS30液体培养基为基础培养基、添加生长调节因子的液体培养基上进行培养,培养过程中添加色胺;所述MS30液体培养基为MS培养基添加30mg/L的蔗糖;所述生长调节因子由0.2~1mg/L萘乙酸、0.2~1mg/L 6-苄基氨基嘌呤、0.05~0.3mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸和20-50mM NH4+/NO3-组成,所述NH4+与NO3-的摩尔比为5:1;培养条件:光照,摇床100~150rpm,温度25±3℃,pH5-6.5;(2)收集相应的悬浮细胞和细胞培养液;(3)分离提取N1-乙酰犬尿胺。
2.如权利要求1所述的利用喜树悬浮细胞生产N1-乙酰犬尿胺的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,添加浓度为10μM~1mM的色胺。
3.如权利要求1或2所述的利用喜树悬浮细胞生产N1-乙酰犬尿胺的方法,其特征在于,所述步骤(1)中的生长调节因子由0.5mg/L萘乙酸、0.5mg/L 6-苄基氨基嘌呤、0.1mg/L2,4-二氯苯氧乙酸和40mM NH4+/NO3-组成,所述NH4+与NO3-的摩尔比为5:1;培养条件:光照25μmolm-2s-l,摇床125rpm,温度25±0.5℃,pH5-6.5。
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