[发明专利]鉴别蛋白类生化原料粗品中动物源性成分的试剂盒及其方法和引物对

权利要求书

1.一种鉴别蛋白类生化原料粗品中动物源性成分的试剂盒，其包括PCR反应体系，其特征在于，所述PCR反应体系至少包括一种引物对，所述的引物对针对所述动物的细胞色素氧化酶亚基I基因设计；其中，

针对猪细胞色素氧化酶亚基I基因设计的所述引物对的正向引物是序列如SEQ ID NO.1所示的核酸，反向引物是序列如SEQ ID NO.2所示的核酸；

针对牛细胞色素氧化酶亚基I基因设计的所述引物对的正向引物是序列如SEQ ID NO.3所示的核酸，反向引物是序列如SEQ ID NO.4所示的核酸；

或者，针对羊细胞色素氧化酶亚基I基因设计的所述引物对的正向引物是序列如SEQ ID NO.5所示的核酸，反向引物是序列如SEQ ID NO.6所示的核酸。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述PCR反应体系还包括PCR反应缓冲液、2’-脱氧核苷三磷酸和Taq酶；较佳地，所述PCR反应体系中Mg²⁺的浓度为2mM；

和/或，4种所述2’-脱氧核苷三磷酸的浓度各为0.2mM；

和/或，所述Taq酶的活力单位为0.025U/μl。

3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述反应缓冲液为Ex Taq缓冲液，所述Taq酶为Takara Ex Taq酶。

4.如权利要求1～3任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述动物选自偶蹄目动物中的一种或者多种；较佳地，所述偶蹄目动物包括猪、牛和羊。

5.一种鉴别蛋白类生化原料粗品中动物源性成分的方法，其特征在于，其包括以下步骤：

1)提取待检样品中的DNA；

2)利用权利要求1～4任一项所述试剂盒中的PCR反应体系扩增上述DNA；

3)电泳检测PCR产物。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤2)所述扩增的PCR反应程序为：(1)95℃预变性3min；(2)95℃变性30s：(3)57℃退火30s；(4)72℃延伸50s；(5)步骤(2)-(4)循环40次；(6)72℃延伸10min；(7)4℃终止。

7.如权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤3)所述电泳为琼脂糖凝胶电泳。

8.一种鉴别蛋白类生化原料粗品中动物源性成分的引物对，其特征在于，所述引物对针对猪细胞色素氧化酶亚基I基因设计，其正向引物是序列如SEQ ID NO.1所示的核酸，反向引物是序列如SEQ ID NO.2所示的核酸；

所述引物对针对牛细胞色素氧化酶亚基I基因设计，其正向引物是序列如SEQ ID NO.3所示的核酸，反向引物是序列如SEQ ID NO.4所示的核酸；

或者，所述引物对针对羊细胞色素氧化酶亚基I基因设计，其正向引物是序列如SEQ ID NO.5所示的核酸，反向引物是序列如SEQ ID NO.6所示的核酸。

9.如权利要求8所述的引物对在制备鉴别蛋白类生化原料粗品中动物源性成分的试剂盒中的应用。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述动物选自偶蹄目动物中的一种或者多种；较佳地，所述偶蹄目动物包括猪、牛和羊。