[发明专利]区分大理重楼和云南重楼的方法

说明书

本发明提供了区分大理重楼和云南重楼的方法，其特征在于：它是采用液相色谱法检测，若检测到含有重楼皂苷VII、H，不含纤细薯蓣皂苷、重楼皂苷I、II或含量均低于0.010％，则可判定为大理重楼。上述检测方法，简单、准确、分析时间短、稳定性好，可以用于大理重楼与云南重楼的区分。

技术领域

本发明涉及中药材检测领域，具体涉及区分大理重楼和云南重楼的方法。

背景技术

《中华人民共和国药典》2015年版一部收载重楼品种为百合科植物云南重楼Parispolyphylla Smith var.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz.或七叶一枝花Parispolyphylla Smith var.chinensis(Franch.)Hara的干燥根茎，具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊的功效。现代研究表明，重楼具有抗肿瘤、止血、免疫调节、镇静、镇痛等作用，甾体皂苷成分为发挥作用的主要活性成分。近年来，因重楼市场需求巨大、野生资源濒危及人工繁育技术要求高、栽培周期长等多因素导致重楼价格飙升，从十年前的50元/kg上涨到700～900元/kg。

大理重楼Paris daliensis H.Li et V.G.Souku和独龙重楼Paris dulongensisH.Li et S.Kuritap隶属百合科Liliacceae重楼属Paris，根茎在云南、贵州等各地民间也作为重楼药材使用，味苦，性微寒，有小毒，具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊之功效，用于痈疮、咽喉肿痛、毒蛇咬伤、跌打损伤、凉风抽搐等症。目前尚未收录到2015年版《中国药典》或者各省级药材标准中。由于以云南白药为代表等系列药品对重楼类根茎的需求量日益加大，重楼属很多植物的根茎，包括大理重楼和独龙重楼均作为重楼药材大量被收购，而大理重楼和独龙重楼可否作为重楼药材的来源以及它们的资源储备如何，可否满足市场需求的研究报道很少，因此，很有必要云南重楼的亲缘品种进行基础研究，为药材供应提供依据。

目前还未见可以在大理重楼与云南重楼的混合品中准确区分两者的方法。当然，也未见区分大理重楼和独龙重楼的方法。

发明内容

2015年版《中国药典》中，以重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅵ和重楼皂苷Ⅶ的质量分数作为评价重楼质量指标，专利申请2016106653439中也记载，云南重楼中主要含有重楼皂苷VII、H、II、I，纤细薯蓣皂苷也会在部分云南重楼中出现，然而，大理重楼却只含重楼皂苷VII和H，不有重楼皂苷II、I和纤细偏诺皂苷。因此，与云南重楼相比，大理重楼所含化学成分中主要有重楼皂苷VII和H，而不含有重楼皂苷II、I和纤细偏诺皂苷，因此，可以通过上述成分将大理重楼与云南重楼鉴别分开。

具体地，本发明提供了区分大理重楼和云南重楼的方法，它是采用液相色谱法检测，若检测到含有重楼皂苷VII、H，不含纤细薯蓣皂苷、重楼皂苷I、II或含量均低于0.010％，则可判定为大理重楼，即可以在大理重楼和云南重楼的混合品中，通过上述方法鉴定出大理重楼，达到区分的效果。

进一步地，其中，重楼皂苷VII的含量在0.3％以上；重楼皂苷H的含量在0.3％以上。

进一步地，其中，不含重楼皂苷VI或者重楼皂苷VI的含量低于0.02％。

进一步地，其中，重楼皂苷VII、VI、II和I的总含量在0.3％以上；重楼皂苷VII、VI、II、I、H和纤细薯蓣皂苷的总含量在1.4％以上。

其中，所述液相色谱法选自UPLC，本发明色谱条件可以采用已知方法进行检测，如专利申请2016106653439，也可以按照本发明下述条件进行：所述UPLC的具体操作如下：

(1)取干燥的待检样品，粉碎，以醇类溶剂或含水醇类溶剂提取，合并提取液，除去溶剂后所剩残渣用甲醇、含水甲醇、乙腈或含水乙腈复溶，制备供试品溶液；

(2)取重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ、H、纤细薯蓣皂苷的混合物，制备对照品溶液；