[发明专利]消痛贴膏指纹图谱质量检测方法

说明书

一种消痛贴膏指纹图谱质量检测方法，取消痛贴膏药芯袋内容物粉末和甲醇溶液，加热回流，冷却，用甲醇溶液补足减失的重量，滤过，取续滤液；梯度洗脱流动相；高效液相色谱分析不同批次的消痛贴膏药物，得各批次药物色谱图，经《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》处理分析，得共有特征对照图谱峰图，根据分离度和样品的重现性从中选取共有峰中的29个峰；获取待检测样品的指纹图谱，用中药指纹图谱计算机辅助相似度评价软件比较两种共有特征对照图谱峰图，29个共有峰计算得到的相似度不小于0.8。该质量检测方法能从色谱的整体面貌上把握消痛贴膏的质量情况，可作为消痛贴膏质量控制的指标，对今后标准化生产提供可利用的质量控制模式。

技术领域

本发明属于中药制剂检测技术领域，涉及一种中药制剂的指纹图谱构建方法，具体涉及一种消痛贴膏药粉或膏或提取物的指纹图谱质量检测方法。

背景技术

消痛贴膏为西藏奇正藏药股份有限公司生产的藏成药，该药采用中国青藏高原特有的天然药物，经特殊低温真空冻干工艺精制而成，主要功能为活血化瘀、消肿止痛，用于急慢性挫伤、跌打瘀伤、骨质增生、风湿及类风湿疼痛，以其卓越的功效享誉国内外，位列中国特有的精品藏药之首。

目前，消痛贴膏的质量控制指标除了测定独一味的含量外，还对独一味、姜黄进行了薄层鉴别，这样虽能控制消痛贴膏的质量，但无法全面掌控质量状况。

发明内容

本发明的目的是提供一种简便、稳定、精密度高、重现性好、易于掌握的消痛贴膏指纹图谱质量检测方法。

为实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：一种消痛贴膏指纹图谱质量检测方法，具体为：

1）取消痛贴膏药芯袋内容物粉末0.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积百分比为70%的甲醇溶液25mL，密塞，称定重量，加热回流60分钟，自然冷却至室温，再称定重量，用体积百分比为70%的甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，得供试品溶液；

所用消痛贴膏内容物粉末可以是组方制备的各种贴膏剂，也可以是按照组方制备的提取物或用原料直接制备的中药细粉或者按照组方制备各种口服临床剂型，如片剂、胶囊、颗粒、缓释制剂等。

2）梯度洗脱流动相：十八烷基键和硅胶为填充剂；用WatersXSelect^TMHSST3色谱柱，5μm，4.6mm×250mm；流动相：A相为蒸馏水，B相为乙腈；梯度洗脱：0→60min，流速1.00mL/min，A相90%，B相10%；60→80min，流速1.00 mL/min，A相70%→40%，B相30%→60%；80→120min，流速1.00 mL/min，A相40%→20%，B相60%→80%；120→125min，流速1.00 mL/min，A相90%，B相10%；

检测波长235nm，柱温25℃，进样量10μL；理论塔板数按山栀苷甲酯峰计，应不低于6000；

3）建立标准药物图谱

选取24批不同批次的消痛贴膏药物，根据步骤1）和步骤2）进行高效液相色谱分析，获得每个批次药物的色图谱，如图1，该色谱图经《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》（2012年版本）处理分析，得高效液相色谱指纹图谱的共有特征对照图谱峰图，如图2，根据分离度和样品的重现性从该特征对照图谱峰图中选取共有峰中的29个峰，作为特征峰；该29个特征峰的峰面积总和占总的峰面积的98%以上；

其中，4号峰：保留时间8.9min，为山栀苷甲酯峰；9号峰：保留时间为23.6min，为8-O-乙酰山栀苷甲酯峰；

4）指纹图谱的质量控制

根据步骤1）和步骤2）获取待检测样品的指纹图谱，采用中药指纹图谱计算机辅助相似度评价软件（国家药典委员会）将待检测样品的共有特征对照图谱峰图与步骤3）中得到的特征对照图谱峰图进行比较，以29个共有峰计算得到的相似度不小于0.8。