[发明专利]一种检测猪瘟猪丹毒猪肺疫三联活疫苗抗原菌含量的选择性培养基及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种检测猪瘟猪丹毒猪肺疫三联活疫苗抗原菌含量的选择性培养基，包括下列组分：TSA29-40mg/ml，牛血清3％～5％，卡那霉素20～80μg/mL，无菌双蒸水适量。

2.根据权利要求1所述的选择性培养基，其特征在于，包括下列组分：TSA30mg/ml，牛血清5％，卡那霉素50μg/mL，无菌双蒸水适量。

3.一种检测猪瘟猪丹毒猪肺疫三联活疫苗抗原菌含量的选择性培养基的制备方法，其特征在于，包括：称取TSA粉末溶于适量灭菌双蒸水中，于121℃高压16～21min，待其自然放凉至45-55℃，加入牛血清和卡那霉素，搅拌均均即可。

4.根据权利要求3所述的选择性培养基的制备方法，其特征在于，包括：称取TSA粉末溶于适量灭菌双蒸水中，于121℃高压16min，待其自然放凉至50℃，加入牛血清和卡那霉素，搅拌均均即可。

5.权利要求1或2所述的选择性培养基或权利要求3或4所述制备方法所制备的选择性培养基，在测定猪瘟猪丹毒猪肺疫三联活疫苗中抗原菌含量中的应用。

6.一种检测猪瘟猪丹毒猪肺疫三联活疫苗猪丹毒抗原菌含量的方法，包括以下操作：

1)用权利要求3或4所述制备方法制备权利要求1或2所述的选择性培养基，待用；

2)待检样本处理：将样本三联疫苗用无菌生理盐水稀释成1mL/头份，取100μL稀释于900μL无菌生理盐水中；重复上述操作，连续稀释6次，取最后一次稀释液(即第6管)100μL接种于步骤1)制备的选择性琼脂平皿中，置于37℃培养24～48h；

3)对步骤2)所得的菌落进行计数。

7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，所述步骤2)中稀释次数为6次；培养温度为37℃；培养时间为36h。

8.根据权利要求6或7所述的检测方法，其特征在于，所述三联疫苗中的猪丹毒抗原菌为猪丹毒G4T10株抗原株。