[发明专利]一种利用小孢根霉少孢变种降解玉米赤霉烯酮的方法

权利要求书

1.一种利用小孢根霉少孢变种降解玉米赤霉烯酮的方法，其步骤如下：

A.小孢根霉少孢变种活化培养：用无菌吸管吸取灭菌PBS缓冲液，滴入放有小孢根霉少孢变种冻干粉的安瓿管内，PBS缓冲液与小孢根霉少孢变种冻干粉的用量比例为0.2～0.5ml：2g，轻轻振荡，使冻干小孢根霉少孢变种菌体溶解呈悬浮状；

B.扩大培养：将步骤A中活化后的菌种接种于121℃高压湿热灭菌后冷却至30-40℃的PDA培养基中扩大培养，28℃，72小时培养至对数生长期；

C.将生长至对数生长期的菌种用PBS缓冲液洗涤至锥形瓶中，菌液浓度为1×10⁶cfu/mL-1×10⁷cfu/mL，取混合均匀菌液接种至粉碎后的玉米中，在28-30℃进行固体发酵，发酵时间为72h；所述的玉米原料中添加了无菌水，菌液、玉米和无菌水的用量比例为10mL：200g：70mL，121℃高压湿热灭菌后冷却至30-40℃。

2.根据权利要求1所述的一种利用小孢根霉少孢变种降解玉米赤霉烯酮的方法，其特征在于：所述PBS缓冲液为：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na₂HPO₄ 10mmol/L，KH₂PO₄2mmol/L，pH值7.2，经高温高压灭菌后置于4℃冰箱保存待用。

3.根据权利要求1所述的一种利用小孢根霉少孢变种降解玉米赤霉烯酮的方法，其特征在于：所述PDA培养基按照下列比例组成：马铃薯浸出粉 5.0g；葡萄糖 20g；琼脂14g 在室温25℃中pH值为5.6±0.2；经高温高压灭菌后备用。