[发明专利]桔小实蝇Taiman基因和其可变剪切体检测方法及其dsRNA在审
| 申请号： | 201710178761.X | 申请日： | 2017-03-23 |
| 公开（公告）号： | CN106916824A | 公开（公告）日： | 2017-07-04 |
| 发明（设计）人： | 豆威;王进军;刘鸿;李慧敏;蒋红波 | 申请（专利权）人： | 西南大学 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C12N15/11;C12N15/113;C12N15/10;C12Q1/68;A01P7/04 |
| 代理公司： | 重庆市前沿专利事务所(普通合伙)50211 | 代理人： | 邹晓艳 |
| 地址： | 400715*** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 桔小实蝇 taiman 基因 可变 剪切 体检 方法 及其 dsrna | ||
1.一种桔小实蝇Taiman基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO:11或12或13或14所示。
2.扩增权利要求1所述的桔小实蝇Taiman基因全长的分段扩增引物对，其特征在于，共计5对引物，引物BdTaiS1-F、BdTaiS1-R、BdTaiS2-F、BdTaiS2-R、BdTaiS3-F、BdTaiS3-R、BdTaiS4-F、BdTaiS4-R、BdTaiS5-F、BdTaiS5-R的序列依次如SEQ ID NO:1～10所示。
3.一种权利要求1所述的桔小实蝇Taiman基因的dsRNA，其特征在于，为由序列如SEQ ID NO:18所示的核苷酸和与其序列互补的核苷酸组成的双链RNA。
4.一种权利要求3所述的桔小实蝇Taiman基因的dsRNA的合成方法，其特征在于，包括如下步骤：提取桔小实蝇的总RNA，反转录成为cDNA作为扩增模板，以序列为SEQ ID NO:16的上游引物和以序列为SEQ IDNO:17的下游引物进行PCR扩增，PCR扩增产物进行电泳后回收产物，以胶回收产物为模板合成得到桔小实蝇Taiman基因的dsRNA。
5.一种对权利要求1所述的桔小实蝇Taiman基因进行qRT-PCR检测的方法，其特征在于，qPCR中的使用的上下游引物为BdTai-core-F、BdTai-core-R，其序列分别如SEQ ID NO:27、28所示。
6.一种针对SEQ ID NO:11所示的桔小实蝇Taiman基因进行qRT-PCR检测的方法，其特征在于，qPCR中的使用的上下游引物为BdTaiA-F、BdTaiA-R，其序列分别如SEQ ID NO:29、30所示。
7.一种针对SEQ ID NO:12所示的桔小实蝇Taiman基因进行qRT-PCR检测的方法，其特征在于，qPCR中的使用的上下游引物为BdTaiB-F、BdTaiB-R，其序列分别如SEQ IDNO:31、32所示。
8.一种针对SEQ ID NO:13所示的桔小实蝇Taiman基因进行qRT-PCR检测的方法，其特征在于，qPCR中的使用的上下游引物为BdTaiC-F、BdTaiC-R，其序列分别如SEQ IDNO:33、34所示。
9.一种针对SEQ ID NO:14所示的桔小实蝇Taiman基因进行qRT-PCR检测的方法，其特征在于，qPCR中的使用的上下游引物为BdTaiD-F、BdTaiD-R，其序列分别如SEQ ID NO:35、36所示。
10.权利要求3所述的dsRNA在桔小实蝇发育、变态与生殖调节方面的应用，在桔小实蝇防治上的应用，或者在制备桔小实蝇杀虫剂方面的应用。
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