[发明专利]一种干旱诱导型启动子、其制备方法、重组表达载体及转化子

权利要求书

1.一种干旱诱导型启动子，其特征在于，所述干旱诱导型启动子的序列如序列表中SEQID NO.1所示。

2.一种制备如权利要求1所述的干旱诱导型启动子的方法，其特征在于，所述方法包括：

提取二穗短柄草的基因组DNA；

将所述基因组DNA通过如序列表中SEQ ID NO:2所示的上游引物和SEQ ID NO:3所示的下游引物进行PCR扩增，得到PCR扩增产物，即所述干旱诱导型启动子。

3.根据权利要求2所述的制备干旱诱导型启动子的方法，其特征在于，所述PCR扩增的反应体系包括：4.8μl ddH₂O、10μl 2×Prime Star GC Buffer、2μl浓度为2.5mM的dNTPmix、1μl浓度为10μM的所述上游引物、1μl浓度为10μM的所述下游引物、0.2μl TakaraPrime Star Taq酶和1μl所述基因组DNA。

4.根据权利要求2所述的制备干旱诱导型启动子的方法，其特征在于，所述PCR扩增的程序为：98℃预变性5min；98℃变性30s，56℃退火30s，72℃延伸85s，扩增20个循环，每次循环结束后退火温度均增加0.5℃；98℃变性30s，65℃退火90s，72℃延伸85s，扩增15个循环；72℃延伸6min。

5.一种干旱诱导型植物的重组表达载体，所述干旱诱导型植物的重组表达载体包括报告基因、选择标记和终止子，其特征在于，所述干旱诱导型植物的重组表达载体还包括：如序列表中SEQ ID NO.1所示的干旱诱导型启动子。

6.根据权利要求5所述的干旱诱导型植物的重组表达载体，其特征在于，所述终止子为胭脂碱合成酶终止子。

7.根据权利要求5所述的干旱诱导型植物的重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体的选择标记为潮霉素抗性。

8.根据权利要求5所述的干旱诱导型植物的重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体以pCAMBIA1381为骨架载体。

9.根据权利要求5所述的干旱诱导型植物的重组表达载体，其特征在于，所述报告基因为β-葡萄糖苷酸酶基因。

10.一种转化子，其特征在于，所述转化子包括如权利要求1所述的干旱诱导型启动子。