[发明专利]一种测定人血清中HER‑2ECD浓度水平的试剂盒

权利要求书

1.一种测定人血清中HER-2 ECD浓度水平的试剂盒，其特征在于：包含试剂R1、试剂R2及校准品Cal三种试剂，所述试剂R1组份包括纯化水、生物缓冲剂、促凝剂、抑凝剂和防腐剂；所述试剂R2组份包括纯化水、生物缓冲剂、包被鼠抗人HER-2 ECD协同单克隆抗体的致敏胶乳颗粒、稳定剂、助悬剂、表面活性剂和防腐剂；所述校准品Cal组份包括纯化水、生物缓冲剂、稳定剂、防腐剂以及重组HER-2 ECD蛋白。

2.根据权利要求1所述的一种测定人血清中HER-2 ECD浓度水平的试剂盒，其特征在于：所述试剂R1组分中生物缓冲剂为2-(N-吗啡啉)乙磺酸，促凝剂为聚乙烯吡咯烷酮K30，抑凝剂为氯化钠，防腐剂为叠氮钠。

3.根据权利要求2所述的一种测定人血清中HER-2 ECD浓度水平的试剂盒，其特征在于：所述1L 的试剂R1组分中2-(N-吗啡啉)乙磺酸 5~10g，PEG20000为1-10g，氯化钠为1-100g，叠氮钠为1g，其余为纯化水，所述试剂R1组分使用氢氧化钠或稀盐酸调节 PH到5.0~7.0。

4.根据权利要求1所述的一种测定人血清中HER-2 ECD浓度水平的试剂盒，其特征在于：所述试剂R2组份中的包被鼠抗人HER-2 ECD协同单克隆抗体的致敏胶乳颗粒是通过以下步骤得到的：

步骤一，胶乳颗粒的清洗：取粒径为250~300nm的羧基微球分散于50mmol/L、PH=6.0的2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液中,缓冲液中胶乳颗粒的浓度为0.5%~1.0%，离心弃上清将洗涤过的胶乳颗粒分散于同等体积的上述2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液中；

步骤二，胶乳颗粒的活化：取碳化二亚胺和N-羟基硫代琥珀酰亚胺分别用2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液溶解后加入胶乳溶液中,混合均匀置于 恒温摇床上反应10~30min，得到活化的胶乳颗粒；

步骤三，胶乳颗粒的抗体致敏：分别向活化完成的胶乳溶液中加入鼠抗人HER-2 ECD单克隆抗体，震荡混合均匀，置于恒温摇床上反应1~3小时；

步骤四，致敏胶乳颗粒的封闭及洗涤：向上述反应体系中加入1%牛血清白蛋白水溶液,混合均匀，置于恒温摇床上反应1~3小时，离心并用储存液重悬，稀释到0.1%~0.5%的终浓度。

5.根据权利要求1所述的一种测定人血清中HER-2 ECD浓度水平的试剂盒，其特征在于：所述试剂R2组分中生物缓冲剂2-(N-吗啡啉)乙磺酸，稳定剂为牛血清白蛋白，助悬剂为海藻糖，表面活性剂为吐温-20，防腐剂为叠氮钠叠氮钠。

6.根据权利要求5所述的一种测定人血清中HER-2 ECD浓度水平的试剂盒，其特征在于：所述1L的 试剂R2组分中2-(N-吗啡啉)乙磺酸 5~10g，牛血清白蛋白为1-10g，海藻糖为10-100g，叠氮钠为1g，吐温-20为1~10ml，1~5g的抗体致敏胶乳颗粒，其余为纯化水，试剂R2 组分溶液的PH为5.0~7.0。

7.根据权利要求1所述的一种测定人血清中HER-2 ECD浓度水平的试剂盒，其特征在于：所述校准品Cal组份中的生物缓冲剂为20mmol/L 磷酸盐缓冲液 ，PH值等于7.5，稳定剂为1%牛血清白蛋白，防腐剂为0.1% 叠氮钠。