[发明专利]用于鉴定受试者所感染的HEV基因型的方法和试剂盒

说明书

本发明属于分子生物学、免疫学以及疾病诊断领域。具体而言，本发明涉及一种HEV抗原表位多肽，所述抗原表位多肽可用于鉴定不同基因型HEV感染。本发明还涉及一种用于鉴定不同基因型HEV感染的试剂盒。本发明还涉及一种基于免疫学检测的鉴定不同基因型HEV感染的方法，为病毒的诊断和流行病学调查等提供了有力的工具。

技术领域

本发明属于分子生物学、免疫学以及疾病诊断领域。具体而言，本发明涉及一种HEV抗原表位多肽，所述抗原表位多肽可用于鉴定受试者所感染的HEV基因型。本发明还涉及一种用于鉴定受试者所感染的HEV基因型的试剂盒。本发明还涉及一种新的鉴定受试者所感染的HEV基因型的方法。

背景技术

戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus，HEV)是引起戊型肝炎的病原体。戊型肝炎病毒(HEV)所导致的戊型肝炎(HE)已成为危害人类健康的严重公共卫生问题。WHO报道全球每年大约有2000万人感染、300多万急性肝炎病例和7万多死亡病例。其中孕妇感染HEV后的病死率更高，可达20％。目前越来越多的研究发现,器官移植后的患者和HIV感染等免疫功能低下的患者感染HEV后,可迁延为慢性肝炎。自2004年来，我国人群中戊型肝炎的发病率逐年上升，且也发现存在多例慢性肝炎。目前，国际公认的可感染人类的HEV基因型有1型、2型、3型和4型。HEV基因1型和2型仅感染人，基因3型和4型能感染人、猪和其它动物。其中，基因2型主要在非洲、中美洲流行，目前尚未在我国发现，其他基因型均已在我国发现。

由于不同基因型HEV具有较明显的流行病学差异，因此明确HEV的基因型对于戊型肝炎的诊断、预防及流行病学具有重要意义。目前常用的基因分型方法主要包括特异性引物扩增后直接测序分析、限制性片段长度酶切多肽性(RFLP)分析、特异性探针PCR法和基因芯片法等，尽管这些方法的特异性和灵敏度很高，但由于这些基因分型方法都需要RNA提取等过程，操作复杂，技术要求高，一般实验室难以开展；而且当样品中RNA阴性或由于保存不当或处理过程中RNA遭到破坏时，则不能进行基因分型。

因此，本领域需要开发不依赖于基因测序的HEV基因分型方法，以实现更加经济、有效、快速、准确地鉴定受试者所感染的HEV基因型。

发明内容

在本发明中，除非另有说明，否则本文中使用的科学和技术名词具有本领域技术人员所通常理解的含义。并且，本文中所用的细胞培养、生物化学、细胞生物学等操作步骤均为相应领域内广泛使用的常规步骤。同时，为了更好地理解本发明，下面提供相关术语的定义和解释。

如本文中所使用的，术语“HEV ORF3蛋白”是指，天然存在于戊型肝炎病毒中的蛋白ORF3，其由HEV基因组的开放读码框架3(ORF3)所编码。不同基因型HEV病毒的ORF3蛋白的序列均是本领域公知的，例如，1型HEV病毒的ORF3蛋白的序列可参见各种公共数据库(例如，GenBank数据库登录号D11092、JQ655734、M73218或X98292)，3型HEV病毒的ORF3蛋白的序列可参见各种公共数据库(例如，例如GenBank数据库登录号AF060668、AP003430、AB073912或AY115488)，4型HEV病毒的ORF3蛋白的序列可参见各种公共数据库(例如，GenBank数据库登录号AB197673、AB097811、AY723745或JQ655736)。