[发明专利]涎液化糖链抗原测定试剂及其制备方法

权利要求书

1.一种涎液化糖链抗原测定试剂，其特征在于，包括预处理试剂、抗体胶乳试剂、校准试剂；

所述预处理试剂包括缓冲剂、信号增强剂、防腐剂，所述预处理试剂的PH值为7.2-7.6；

所述抗体胶乳试剂包括缓冲剂、结合有抗人涎液化糖链抗原抗体的胶乳微球、稳定剂，所述胶乳微球直径为100-400nm；

所述校准试剂包括定量的涎液化糖链抗原。

2.根据权利要求1所述的涎液化糖链抗原测定试剂，其特征在于，所述预处理试剂中的缓冲剂为磷酸盐、三羟甲基氨基甲烷、甘氨酸、4-羟乙基哌嗪乙磺酸中的一种，信号增强剂为聚乙二醇10000、氟化钠中的一种。

3.根据权利要求1所述的涎液化糖链抗原测定试剂，其特征在于，所述抗体胶乳试剂中与胶乳微球结合的抗人涎液化糖链抗原抗体为鼠抗人涎液化糖链抗原单克隆抗体、羊抗人涎液化糖链抗原单克隆抗体、兔抗人涎液化糖链抗原单克隆抗体中至少一种，或者是鼠抗人涎液化糖链抗原多克隆抗体、羊抗人涎液化糖链抗原多克隆抗体、兔抗人涎液化糖链抗原多克隆抗体中至少一种。

4.根据权利要求1所述的涎液化糖链抗原测定试剂，其特征在于，所述抗体胶乳试剂中的稳定剂为环糊精、酪蛋白、抗坏血酸中的一种或多种。

5.一种涎液化糖链抗原测定试剂的制备方法，其特征在于，分别制备预处理试剂、抗体胶乳试剂、校准试剂；

所述预处理试剂的制备方法包括以下步骤：将缓冲剂、信号增强剂、防腐剂、无机盐与水混合调配为PH值为7.2-7.6的溶液即得；

所述抗体胶乳试剂的制备方法依次包括以下步骤：

S1、将抗人涎液化糖链抗原抗体在PH8.0-9.0的碳酸氢钠缓冲溶液中，于2-8摄氏度进行至少两次透析，以除去干扰标记反应的杂质；

S2、将透析后的抗人涎液化糖链抗原抗体溶液用pH9.0-9.5的磷酸盐缓冲液稀释到1-2mg/ml，加入适量的荧光素，在25摄氏度持续、轻微混合1小时，进行标记反应以制得荧光素化抗人涎液化糖链抗原抗体溶液；

S3、将步骤S2所得溶液在pH7.5-8.0的磷酸盐缓冲液中，于2-8摄氏度进行至少两次透析，除去未反应的荧光素；

S4、将透析后的荧光素化抗人涎液化糖链抗原抗体溶液与适量的结合有抗荧光素抗体的胶乳微球溶液混合，在25摄氏度持续、轻微混合1小时，并加入稳定剂即得；

所述校准试剂的制备方法包括以下步骤：使用稀释液将涎液化糖链抗原稀释到所需浓度即得。

6.根据权利要求5所述的涎液化糖链抗原测定试剂的制备方法，其特征在于，所述抗体胶乳试剂的制备步骤S2中的荧光素为活化荧光素，用超纯水溶解后直接进行标记反应。

7.根据权利要求5所述的涎液化糖链抗原测定试剂的制备方法，其特征在于，所述抗体胶乳试剂的制备步骤S4中稳定剂为环糊精、酪蛋白、抗坏血酸中的一种或多种。

8.根据权利要求5所述的涎液化糖链抗原测定试剂的制备方法，其特征在于，所述抗体胶乳试剂的制备步骤S4中的胶乳微球为单一的粒径，或由不同粒径大小的胶乳微球混合而成。