[发明专利]一种乳腺癌复发风险评估21基因检测引物及其应用在审
| 申请号： | 201710168670.8 | 申请日： | 2017-03-21 |
| 公开（公告）号： | CN107058523A | 公开（公告）日： | 2017-08-18 |
| 发明（设计）人： | 任绪义;虞闰六;施宏 | 申请（专利权）人： | 温州迪安医学检验所有限公司;杭州迪安医学检验中心有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙)32204 | 代理人： | 丁静静,肖明芳 |
| 地址： | 325014 浙江省温州市瓯海区梧田*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 乳腺癌 复发 风险 评估 21 基因 检测 引物 及其 应用 | ||
1.一种乳腺癌复发风险评估21基因检测引物，其特征在于，包括SEQ ID NO.：1～42所示的核苷酸序列。
2.一种乳腺癌复发风险评估21基因检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒中包括SEQ ID NO.：1～42所示的引物。
3.权利要求1所述的乳腺癌复发风险评估21基因检测引物在乳腺癌复发风险评估中的应用。
4.一种乳腺癌复发风险评估21基因检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)石蜡组织RNA提取；
(2)逆转录；
(3)荧光定量PCR扩增；
(4)结果分析：判断复发预测风险具体按照如下标准：低风险：RS≤18；中风险：18＜RS＜31；高风险：RS≥31。
5.根据权利要求4所述的乳腺癌复发风险评估21基因检测方法，其特征在于，步骤(2)中，逆转录反应体系为20μL，其中，模板RNA 11μL，RT酶1μL，RI酶1μL，dNTP 2μL，5×buffer 4μL，随机引物1μL；
逆转录反应条件：42℃30min，95℃5min。
6.根据权利要求4所述的乳腺癌复发风险评估21基因检测方法，其特征在于，步骤(3)中，荧光定量PCR扩增体系为：PCR反应体系为20μL，其中2×Mix 10μL，上游与下游混合引物(10μmol/L)0.4μL，模板RNA2μL，焦碳酸二乙酯(DEPC)处理水7.6μL。
7.根据权利要求4所述的乳腺癌复发风险评估21基因检测方法，其特征在于，步骤(3)中，荧光定量PCR反应条件为：94℃20s，60℃15s，延伸72度15s，荧光采集点在60℃，反应体积设置为20μL。
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