[发明专利]一种从狼牙刺花中提取氧化槐果碱的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物提取技术领域，具体涉及一种从狼牙刺花中提取氧化槐果碱的方法。

背景技术

狼牙刺又名白刺花, 为豆科槐属多年生灌木, 多生于海拔400～1500m的阳坡或河谷地带, 广泛分布于我国华北、江苏、浙江、湖北、河南、陕西、甘肃及西南等省。狼牙刺的根、茎、叶、花、果实和种子中都含有生物碱，包括氧化苦参碱、槐果碱、槐定碱等多种生物碱。狼牙刺作为一种民间药材被广泛使用,氧化槐果碱是中草药的主要有效成分，具有抗炎、保肝、抗肿瘤、抗心率失常、免疫调节、升高白细胞及杀菌、杀虫、利尿、平喘、抗心律失常等作用，是研制多种人体用药、洗涤用品及杀虫类生物农药的重要原料。

目前，直接从植物中提取氧化槐果碱的提取率低，一般是采用先从植物中提取得到槐果碱，再利用工业制备方法将槐果碱制备成氧化槐果碱，此种方法过程复杂、成本高。中国专利（CN102786523 A）公开了一种从苦豆子中制备槐果碱的方法，利用苦豆子中各种生物碱极性不同的原理，将苦参碱、槐果碱与其他碱分离，再分离出槐果碱。但是，这种方法只能提取得到槐果碱。氧化槐果碱主要通过工业制备方法获取，导致制备工艺繁琐，例如，中国专利（CN1354181 A）是将槐果碱加入双氧水中，然后将反应液萃取或者减压浓缩得到氧化槐果碱。

中国专利（CN 1473830A）公开了一种从白刺花中提取苦参碱的方法，是将白刺花的地上部分用盐酸浸泡，然后经过甲苯回流，煮沸，加还原剂，萃取，加酸制得苦参总碱后，将苦参总碱离心分离，经过氢化、重结晶后制备得到苦参碱和槐定碱。但是，该工艺中制备得到的苦参总碱中，槐果碱和氧化槐果碱的提取率极低，而且该工艺中使用甲苯对人体有害，难以推广应用。

目前仅仅对狼牙刺种子进行生物碱提取和系列产品开发利用，而狼牙刺结实率极低，仅有不到10%的花能够成熟为种子，90%以上的花在生长过程中造成落花浪费；另外，狼牙刺种子的收集难度大且收集率低，而花朵收集率高且易收集。因此，对狼牙刺花进行开发利用，提取其中的氧化槐果碱具有积极意义。

发明内容

针对现有技术的缺陷，本发明提供一种从狼牙刺花中提取氧化槐果碱的方法，具有提取率高、纯度高的优点。

本发明是通过以下技术方案实现的。

一种从狼牙刺花中提取氧化槐果碱的方法，包括以下步骤：

（1）预处理：称取香菇，按照料液比1g：30 mL加入水，40-50℃加热40-60min，冷却后，过滤，香菇回收利用，得到的香菇滤液备用；将狼牙刺花和得到的香菇滤液按照料液比1:8混合，在3-6℃下浸泡2h，每隔20min翻动搅拌一次，过滤，得到预处理过的狼牙刺花；

（2）提取：将步骤（1）预处理过的狼牙刺花，按照料液比1g：8 mL加入至少含有一种有机溶剂的溶液，浸泡72h，过滤后收集滤液和滤渣，滤渣按照料液比1g：8 mL用至少含有一种有机溶剂的溶液继续浸泡48 h，过滤后收集滤液和滤渣，合并2次得到的滤液，将滤液经旋转蒸发仪减压浓缩得到氧化槐果碱粗提物浸膏；将滤渣按照料液比1g：10 mL加入质量浓度为1%-5%的乙酸溶液，浸泡72h，过滤后收集滤液和滤渣，滤渣按照料液比1g：10 mL用质量浓度为1%-5%的乙酸溶液继续浸泡48 h，过滤后收集滤液，滤液经过真空浓缩得到氧化槐果碱粗提物浸膏；合并2次得到的氧化槐果碱粗提物浸膏，备用；

（3）水沉除杂：将步骤（2）最终得到的氧化槐果碱粗提物浸膏中加入3-5倍质量的水，用氨水调节pH至11，室温下静置48 h后过滤，收集滤液；

（4）将步骤（3）得到的滤液经过真空浓缩得到浓缩膏、浓缩膏真空干燥后、采用甲醇和二氯甲烷为洗脱液进行硅胶柱分离、加入乙醚进行结晶分离、加入丙酮重结晶后进行干燥，即得到氧化槐果碱纯品。

优选地，步骤（1）中所述至少含有一种有机溶剂的溶液为甲醇、乙醇、氯仿或二氯甲烷中的任意一种。

优选地，步骤（1）中所述至少含有一种有机溶剂的溶液为体积比为（85-95）：（5-15）的甲醇和氯仿的混合物、体积比为9:1的甲醇和乙酸的混合物、或者体积比为（30-50）：（50-70）的浓氨水和氯仿的混合物中的任意一种。

优选地，上述浓氨水的质量浓度为27%。

优选地，步骤（2）和步骤（4）中所述的真空浓缩为：将滤液在60-65℃、真空度-0.075至-0.081MPa下真空浓缩20-25min，得到浓缩膏。