[发明专利]一种山楂叶中黄酮单体的制备方法

权利要求书

1.一种山楂叶中黄酮单体的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

1)将山楂叶粉碎、提取、富集、蒸干，制得山楂叶总黄酮样品；

2)应用高速逆流色谱法将样品中的槲皮素-3-O-(2,6-di-α-L-吡喃鼠李糖基)-β-D-半乳糖苷，4”-O-牡荆素葡糖苷、异槲皮苷和(2R,3R)-3,5,7,3',5'-五羟基黄烷进行分离纯化；

溶剂系统为氯仿：甲醇：水：正丁醇＝3.5-4.5:2.5-3.5:1.5-2.5:1-2，v/v；

高效逆流色谱仪的分离参数为：柱体积200-400mL，上样量150-800mg，转速600-1000rpm，上相为固定相，下相为流动相，流动相的流速1-10mL/min，检测波长254nm；

步骤1)中，所述提取是将一定质量的山楂叶粉末用7-9倍量的50-95％乙醇加热回流提取，得提取液；对山楂叶粉末提取的次数为2-4次，每次提取1.5-2.5h；将提取液减压回收乙醇，至无醇味，加入一定量热水，过滤后，得到上柱溶液，将上柱溶液用大孔树脂柱富集，洗脱、浓缩，制得总黄酮样品；

其中，洗脱包括如下步骤：先用纯水洗脱，再用70％乙醇洗脱，将70％乙醇的洗脱物合并收集；

步骤2)中的具体操作为：启动高速逆流色谱仪，根据其检测器的紫外光谱图接收目标成分，制得(2R,3R)-3,5,7,3',5'-五羟基黄烷、异槲皮苷和4”-O-牡荆素葡糖苷，然后将逆流色谱管内溶液按照从头到尾的模式吹出，根据色谱图收集，制得槲皮素-3-O-(2,6-di-α-L-吡喃鼠李糖基)-β-D-半乳糖苷。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：高速逆流色谱法的溶剂系统为氯仿：甲醇：水：正丁醇＝4：2.5-3.5：1.5-2.5：1-2，v/v。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：高效逆流色谱仪的分离参数为：柱体积300mL，上样量200mg，转速850rpm，流动相的流速5.0mL/min。