[发明专利]自然杀伤细胞活性测定方法

权利要求书

1.一种自然杀伤细胞活性测定方法，其特征在于包括以下步骤：

1)将靶细胞K562传代培养；

2)对效应细胞中自然杀伤细胞比例进行分析；

3)设定效靶比，所述效靶比为NK细胞与靶细胞之比，依据效应细胞有核细胞密度、效应细胞活率及其有核细胞中NK细胞比例计算所需效应细胞体积，将靶细胞与效应细胞按照设定的效靶比进行培养；

4)检测步骤3)中培养的靶细胞死亡率；

5)将步骤4)中靶细胞死亡率带入公式计算自然杀伤细胞活性：

自然杀伤细胞活性＝(待测靶细胞死亡率-对照组靶细胞死亡率)/(1-对照组靶细胞死亡率)╳100％。

2.如权利要求1所述的自然杀伤细胞活性测定方法，其特征在于，步骤3)中的效靶比为4以上。

3.如权利要求1所述的自然杀伤细胞活性测定方法，其特征在于，步骤1)中对传代细胞进行密度和/或死亡率的质量控制。

4.如权利要求1所述的自然杀伤细胞活性测定方法，其特征在于，步骤2)中对效应细胞进行细胞密度、活细胞率及自然杀伤细胞比例至少之一的质量控制。

5.如权利要求3所述的自然杀伤细胞活性测定方法，其特征在于，所述质量控制包括将传代培养的靶细胞进行染料标记。

6.如权利要求4所述的自然杀伤细胞活性测定方法，其特征在于，包括用抗体对自然杀伤细胞进行标记。

7.如权利要求3所述的自然杀伤细胞活性测定方法，其特征在于，控制靶细胞自然死亡率在3％以内。

8.如权利要求3所述的自然杀伤细胞活性测定方法，其特征在于，靶细胞与效应细胞FH1通道平均荧光强度值之比为80倍以上。

9.如权利要求1-8之一所述的自然杀伤细胞活性测定方法，其特征在于，在步骤4)中将与仅有靶细胞对照管相比，效靶细胞混合孵育检测管内靶细胞浓度低于前者85％的检测结果舍去。

10.如权利要求1所述的自然杀伤细胞活性测定方法，其特征在于，依据检测对象是否患过肿瘤选择效靶比。