[发明专利]一种基于油滴生成技术的转基因玉米高通量检测方法

权利要求书

1.一种基于油滴生成技术的转基因玉米高通量检测方法，其特征在于，按照如下步骤进行：

1)转基因玉米基因组DNA模板的提取；

2)采用油滴生成器制备多重油滴；

3)多重油滴定性PCR反应；

4)多重油滴定性PCR扩增产物的纯化；

5)多重油滴定性PCR扩增产物毛细管电泳分离；

6)毛细管电泳图像采集；

7)进行多重样品分析，获得样品最优结果。

2.根据权利要求1所述的基于油滴生成技术的转基因玉米高通量检测方法，其特征在于，所述步骤1)中的转基因玉米基因组DNA提取是用TianGen Plant Genomic DNA Kit(Cat.#DP-305)试剂盒对转基因玉米标准物质(AOCS,IRMM)进行提取。

3.根据权利要求1所述的基于油滴生成技术的转基因玉米高通量检测方法，其特征在于，所述步骤2)中油滴生成器采用Bio-Rad公司QX200 Auto DG Droplet Digital PCR System，油包水反应体系大小均匀，直径1nm。

4.根据权利要求1所述的基于油滴生成技术的转基因玉米高通量检测方法，其特征在于，所述步骤4)中多重油滴定性PCR扩增产物为油水混合物，采用TianGen公司Universal DNA Purification Kit(Cat.#DP214-02)试剂盒进行纯化。

5.根据权利要求1所述的基于油滴生成技术的转基因玉米高通量检测方法，其特征在于，所述步骤5)对多重油滴定性PCR反应纯化产物进行毛细管电泳定量分离的仪器为Agilent 2100 Bioanalyzer system。

6.根据权利要求1所述的基于油滴生成技术的转基因玉米高通量检测方法，其特征在于，所述步骤6)中毛细管电泳图像采集方法为：采用Agilent 2100 Bioanalyzer system软件对不同扩增产物阈值以及Maker进行设定，最终形成可见的峰图电泳图。

7.根据权利要求1所述的基于油滴生成技术的转基因玉米高通量检测方法，其特征在于，所述步骤7)中多重样品分析：对于20-32种不同转基因玉米目的片分为4组，分别进行4-6重油滴PCR，对于不同组进行分别优化，实现20-32种同时检测。