[发明专利]一种鹅去氧胆酸的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体涉及在一种猪去氧胆酸合成鹅去氧胆酸的制备方法。

背景技术

鹅去氧胆酸(CDCA)主要作用是降低胆汁内胆固醇的饱和度，绝大多数患者服用CDCA后，当CDCA占胆汁中胆盐的70％时，脂类恢复微胶粒状态，胆固醇就处于不饱和状态，从而使结石中的胆固醇溶解、脱落。大剂量的CDCA可以抑制胆固醇的合成，并增加胆石症患者胆汁的分泌，但其中的胆盐和磷脂分泌量维持不变。此外，鹅去氧胆酸又是合成熊去氧胆酸和其他甾体化合物的原料，作为熊去氧胆酸的差向异构体，它的人工合成也受到越来越多的关注。

鹅去氧胆酸作为一种甾体类化合物，主要从动物胆汁中提取，在临床上用于治疗各种胆疾及消化道疾病具有良好的效果，目前也是世界上用量最大的治疗胆结石药物之一。

猪胆是为人们所熟知的猪内脏，并大部分被废弃，实际上猪胆汁中含有丰富的猪去氧胆酸，因此以猪去氧胆酸作为原料来合成鹅去氧胆酸已经成为这类胆烷酸的主流方法。目前主要路线如下：一是利用1，2-酮基移位反应，使6位羟基转化为7位羟基，猪去氧胆酸经甲酯化，6位羟基选择性氧化得6-酮，然后在LDA作用下与二甲基硅烷反应区域选择性地生成烯醇硅醚，立即与间氯过苯甲酸反应或在含吡啶的二氯甲烷中臭氧化得3a，7a-二羟基-6羰基-5β-胆烷酸甲酯，再与苯磺酰肼反应后立即用NaBH4在酸性条件下还原得鹅去氧胆酸，最后脱脂化得到鹅去氧胆酸。此法反应步骤冗长，收率较低，成本居高不下。一是以猪去氧胆酸为原料，合成3-酮结构单元化合物后经6，7位脱氢、环氧化、催化氢化实现重建5β构型的目的，构成了AB环顺式结构，猪去氧胆酸甲酯化后与对甲苯磺酰氯反应生成3β-羟基胆烷酸甲酯，经Oppenauer氧化后用四氯苯醌进行脱氢得3-酮胆烷酸甲酯，用间氯过苯甲酸对6，7位双键进行环氧化得6a，7a-环氧-3-酮胆烷酸甲酯，最后脱脂化得到鹅去氧胆酸。但此法采用了钾-液氨碱金属还原构建7β-OH构型，要求低温反应，条件即为苛刻，操作不变，不利于大规模生产。

发明内容

[要解决的技术问题]

本发明的目的是解决上述现有技术问题，提供一种鹅去氧胆酸的制备方法，该制备方法利用猪去氧胆酸为原料，采用甲酯化保护羧基并初步纯化后，将6位羟基消去后，然后羟基化得到鹅去氧胆酸。

[技术方案]

为了达到上述的技术效果，本发明采取以下技术方案：

一种鹅去氧胆酸的制备方法，它包括以下步骤：

A，猪去氧胆酸的精制

取猪去氧胆酸粗品，加入乙酸乙酯后，加热回流1h，缓慢搅拌降温至0～5℃，结晶、过滤得到精制的猪去氧胆酸；

B，猪去氧胆酸甲酯化物的制备

取步骤A精制得到的猪去氧胆酸，加入甲醇，然后按照猪去氧胆酸与甲磺酸的质量比为45～55：1加入甲磺酸，25～30℃搅拌反应至反应完成98％以上，80℃下常压回收甲醇；接着加入甲苯，加热搅拌后，再加入碳酸钠溶液，搅拌反应1～2h后，静置分层，去除下层水层；抽真空加热回收甲苯，得到猪去氧胆酸甲酯化物；

C，6位羟基的消去

取步骤B制得的猪去氧胆酸甲酯化物用乙酸乙酯溶解，然后加入次氯酸钠溶液，常温下搅拌反应4～6h后，静置分层，去除下层水层，回收乙酸乙酯；接着向上层加入水合肼、乙二醇甲醚和氢氧化钾，加热回流反应至少15h后，反应至反应完成98％以上，抽真空加热回收混合溶剂；

D，鹅去氧胆酸的制备

向步骤C得到的混合溶剂中加入甲醇溶解，缓慢加入连二亚硫酸钠和溴液，在10～20℃下搅拌反应3～4h后，80℃下常压回收甲醇；然后加水，并加热至60～70℃，滴加氢氧化钠溶液，维持pH值为11～12，搅拌反应3～4h；接着降温至25～30℃，滴加稀硫酸调节pH值为3～4，搅拌结晶、过滤得到鹅去氧胆酸。

本发明更进一步的技术方案，在步骤A中，所述猪去氧胆酸粗品与乙酸乙酯的质量体积比为1：2。

本发明更进一步的技术方案，在步骤B中，所述猪去氧胆酸与甲醇的质量体积比1：2～3；所述猪去氧胆酸与甲苯的质量体积比为1：5～6。

本发明更进一步的技术方案，在步骤B中，所述加热搅拌是至加热至60～70℃搅拌1h。

本发明更进一步的技术方案，在步骤B中，所述碳酸钠溶液是质量浓度为2％的碳酸钠溶液，所述猪去氧胆酸与碳酸钠溶液的质量体积比为1：5。

本发明更进一步的技术方案，在步骤B和步骤C中，反应至反应完成98％是采用HPLC进行确认的。