[发明专利]一种降低革叶卫矛组培污染率的培养基及其方法

说明书

本发明涉及植物组织培养技术领域，特别涉及一种降低革叶卫矛组培污染率的培养基及其方法。本发明提供的培养基配方可将革叶卫矛组织培养的污染率控制在10％以内，同时保证成活率达95％以上，大大节省革叶卫矛组培快繁生产成本，提高其组培快繁生产效率，适宜大规模应用及推广。

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，尤其涉及一种降低革叶卫矛组培污染率的培养基及其方法。

背景技术

革叶卫矛(Euonymus lecleri Lévl.)灌木或小乔木，高1-7米，属于卫矛科卫矛属植物，是中国特有植物。分布于湖北、湖南、四川、贵州等地，生长于海拔1,300米至2,900米的地区，多生长于山地林荫和沟边。卫矛属植物在园林应用中应用较为普遍，多用于孤植、丛植及群植，是优良的园林观赏植物和绿化树种。革叶卫矛作为一种常绿树种，耐荫耐寒，抗逆性强，在北方地区具有很高的观赏和应用价值。随着“南树北引”的逐渐成熟，革叶卫矛逐渐被广泛应用于园林景观规划中。

植物组织培养技术作为现代生物技术的重要领域之一，在农业生产领域和工厂化育苗方面应用广泛，对于植物优良种质资源保存、优良品种的快速繁殖等方面也发挥着重要的作用。

目前，革叶卫矛的组培技术尚处在研究阶段。在无菌培养中，由于种种原因使革叶卫矛组培苗很容易受到污染，从而导致一些珍贵材料丢失，这无疑对于组培繁殖来说是致命的。而目前有关降低革叶卫矛组培污染率的培养技术尚未有报道。因此，如何有效地减少污染对革叶卫矛组培苗造成的损失，对于构建革叶卫矛植物组织培养快繁体系起到至关重要的作用。

发明内容

有鉴于此，本发明提供一种降低革叶卫矛组培污染率的培养基及其方法，该培养基能够有效控制革叶卫矛组培苗的污染率，同时保证较高的成活率。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种降低革叶卫矛组培污染率的培养基，为含有0.7-1.0mg/L 6-BA、0.1-0.4mg/L NAA、50-80mg/L抱朴香桂精油、20～30g/L蔗糖和7～8g/L琼脂的MS培养基，pH值为5.8～6.0。

采用本发明提供的培养基配方可使得革叶卫矛组培苗的污染率控制在10％以内，同时保证成活率达95％以上，大大节省革叶卫矛组培快繁生产成本，提高其组培快繁生产效率，适宜大规模应用及推广。

优选地，本发明提供的培养基为：含有1.0mg/L 6-BA、0.1mg/LNAA、50mg/L、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的MS培养基，pH值为5.90。

本发明还提供了一种降低革叶卫矛组培污染率的方法，包括以下步骤：

步骤1：将革叶卫矛外植体接种到权利要求1或2所述的培养基上，获得组培苗；

步骤2：所述步骤1获得的组培苗培养10～15d后，转入含有0.7-1.0mg/L6-BA、0.1-0.4mg/L NAA、20～30g/L蔗糖和7～8g/L琼脂的MS培养基上进行培养。

本发明首次针对减低革叶卫矛的组培污染率的快繁技术进行了研究，通过向培养基中添加适当浓度的抱朴香桂精油，并结合双诱导培养基法、外植体消毒、外植体前处理改良操作等，最终在保证组培苗成活率的前提下将组培苗污染率控制在10％以内，同时保证成活率达95％以上，优化了革叶卫矛组培快繁体系的生产操作流程，大大降低了工厂化育苗的时间和成本。

其中，双诱导培养基法，是指采用两种培养基进行诱导培养，首先，将革叶卫矛外植体接种在含有0.7-1.0mg/L 6-BA、0.1-0.4mg/L NAA、50-80mg/L、20～30g/L蔗糖和7～8g/L琼脂的MS培养基，培养10d后，再转入含有0.7-1.0mg/L 6-BA、0.1-0.4mg/L NAA、20～30g/L蔗糖和7～8g/L琼脂的MS培养基。