[发明专利]一种降低革叶卫矛组培污染率的培养基及其方法有效
申请号: | 201710150116.7 | 申请日: | 2017-03-14 |
公开(公告)号: | CN106797890B | 公开(公告)日: | 2018-12-11 |
发明(设计)人: | 张丹;张茂;郭冠男;孟伟芳;赵志汝;王东超 | 申请(专利权)人: | 河南红枫种苗股份有限公司 |
主分类号: | C12N5/04 | 分类号: | C12N5/04;A01H4/00 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 赵青朵 |
地址: | 450000 河南省郑州*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 降低 革叶卫矛组培 污染 培养基 及其 方法 | ||
1.一种降低革叶卫矛组培污染率的诱导培养基,其特征在于,所述培养基为:含有0.7-1.0mg/L 6-BA、0.1-0.4mg/L NAA、50-80mg/L抱朴香桂精油、20~30g/L蔗糖和7~8g/L琼脂的MS培养基, pH值为5.86~5.90。
2.根据权利要求1所述的诱导培养基,其特征在于,所述培养基为:含有1.0mg/L 6-BA、0.1mg/L NAA 、50mg/L抱朴香桂精油、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的MS培养基, pH值为5.90。
3.一种利用权利要求1或2所述诱导培养基降低革叶卫矛组培污染率的方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤1:将革叶卫矛外植体接种到权利要求1或2所述的培养基上,获得组培苗;
步骤2:所述步骤1获得的组培苗培养10~15d后,转入含有0.8-1.0mg/L 6-BA 、0.1-0.3mg/L NAA、20~30g/L蔗糖和7~8g/L琼脂的MS培养基上进行培养。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤1所述外植体接种之前还包括外植体消毒步骤,所述外植体消毒后再进行前处理步骤;
所述前处理具体为:取革叶卫矛外植体→酒精浸泡30s→无菌水冲洗2次,每次2min→0.1%升汞浸泡8min→无菌水冲洗2次,每次2min→换杯→0.1%升汞浸泡8min→无菌水冲洗2次,每次2min→换杯→0.1%升汞浸泡8min→无菌水冲洗2min→换杯→无菌水冲洗3min→换杯→无菌水冲洗3min。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述消毒具体为:取外植体采用流水冲洗30-40min,再用0.1%次氯酸钠浸泡10-15min。
6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤1中所述接种具体为:
初次接种前酒精灯上烤两把镊子一把刀,一把镊子处理外植体,一把镊子用来接种;接种前,事先在酒精灯上烤另一把镊子和刀,放置在培养皿上备用,待此盘接种完毕,再烤一把镊子放置于培养皿上备用,并用事先高温消毒的一把镊子和刀处理下一盘外植体,以此类推,直到接种完毕。
7.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述革叶卫矛外植体为带腋芽的茎段、叶片或叶柄。
8.根据权利要求3至7任一项所述的方法,其特征在于,所述革叶卫矛组织培养的培养温度为24~26℃,光照时间为12~18h/d,光照强度为2000~2500lx,相对湿度为 45%~50%。
9.根据权利要求3至7任一项所述的方法,所述革叶卫矛组织培养的过程中还包括组培室灭菌步骤,所述组培室灭菌具体为:每天早上或者晚上开紫外灯杀菌30min,每周打开臭氧发生器,杀菌15min。
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