[发明专利]从鲎试剂废料中提取抑菌组合物制备妇科洗液的方法

说明书

本发明涉及一种从鲎试剂废料中提取抑菌组合物制备妇科洗液的方法，方法包括：第一步，在鲎试剂废料中提取抑菌组合物，具体包括：(1)收集鲎试剂生产工艺中丢弃的乳化物沉淀及丢弃的血浆；(2)由丢弃的乳化物沉淀制备鲎素肽粗提液；(3)由丢弃的血浆制备血蓝蛋白粗提液；(4)由丢弃的血浆制备SOD粗提液；(5)三种粗提液混合制备抑菌组合物；第二步，(1)按质量百分比抑菌组合物：50％～60％，甘油：0.5％～1.5％，柠檬酸：0.5％～1.5％，十二烷基葡萄糖苷：1％～2％，去离子水：余量配置妇科洗液组份，(2)按制备工艺得到妇科洗液成品。本方法获得的妇科洗液能有效的抑制各类细菌及真菌的生长，较传统化学妇科洗液更为安全、温和、无毒副作用，避免耐药性和过敏现象，较传统中药妇科洗液有更加明显的抑菌效果，同时，产品成本较低，适合市场推广。

技术领域

本发明涉及妇科洗液技术领域，具体是一种从鲎试剂废料中提取抑菌组合物制备妇科洗液的方法。

背景技术

鲎，又称马蹄蟹，是一种生活在海洋中的大型底栖节肢动物,从早古生代的奥陶纪出现至今已有4亿多年的历史,是动物界具有独特进化地位的“活化石”之一。鲎是无脊椎动物血液学研究的绝好材料,也是目前鲎资源开发利用和鲎试剂研制的主要原材料,一直受到日、美等国学者的高度重视。随着对鲎血淋巴的免疫功能研究以及和其他无脊椎动物血淋巴的免疫学比较研究,尤其是从鲎血淋巴中分离出许多具有抗菌、抗病毒的活性物质。总体而言，鲎作为一种具有巨大医药开发潜力的重要资源，为世界各国高技术产业所瞩目。

目前鲎的主要用途是制备鲎试剂。鲎血细胞中的颗粒细胞中含有能与内毒素起凝集作用的酶系统。根据此原理，世界各国研究人员经不懈努力，开发出了用于药品细菌内毒素检测的鲎试剂。同时，鲎试剂还能被β-葡聚糖激活，而1-3-β-D葡聚糖是真菌细胞壁的特有成分，从而鲎试剂亦被开发应用于检测深度真菌感染。但鲎试剂的提取过程中仅利用到了鲎血细胞，剩余的其他成分并未得到有效开发利用。鲎试剂的提取过程包括：

a鲎细胞裂解液的配制：裂解液为Tris-HCl,NaCl缓冲液。其中，所述缓冲液为pH7-8，NaCl，Tris-HCl可根据实际情况调节，一般为50mmol/L NaCl，20mmol/L Tris-HCl；

b鲎细胞的裂解乳化：取全血离心后的鲎细胞，按1:5-1:8.5的比例加入鲎细胞裂解液，使用高速匀浆机匀浆5-20分钟，既得鲎细胞裂解乳化物。

c鲎细胞裂解液分离提纯：将上述乳化物低温离心25-30分钟，取上清液，分装备用，即为鲎细胞裂解液。向裂解液中以1:1-1:2的比例加入氯仿溶液，低温搅拌离心后，仔细取出上清液备用。

d制剂：取c步骤中最终上清液，各生产厂家根据自身情况，向其中添加多肽显色基质，低温搅拌分装后，真空冷冻干燥后即得鲎试剂。

另外，由上述鲎试剂的提取过程，也可看出，作为鲎全血的另一组成部分，鲎血浆并未得到有效利用，而是直接被废弃。

同时，鲎素是一类存在于鲎血细胞中的具有抗菌活性的阳离子多肽，它的发现被医学界称为“抗生素”研究的一个里程碑，是后抗生素时代到来的标致。自1988年日本学者NakamuraT从东方鲎中分离提取鲎素以来，鲎素的研究引起了人们的广泛关注，研究表明，鲎素具有以下抗菌特性：(1)杀菌活力高，致死浓度均在μmol/L级，(2)作用迅速，往往在几秒或几分钟内可将99％以上的病原杀灭，(3)对真核生物细胞无毒性，(4)活性稳定，比较耐热，100℃处理30min不丧失其抗菌活性，(5)在高盐环境下同样具有抗菌活性，鲎素的抗微生物作用远远超过目前抗生素药物的作用范畴，对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌及囊膜病毒均能产生有效的杀伤作用，对人宫颈癌细胞也具有很好的抑制作用，且没有耐药性问题。