[发明专利]CREB结合蛋白抑制剂GNE‑272的制备方法

说明书

技术领域

本方法属于药物化学领域。

背景技术

GNE-272，化学名(S)-1-(3-((2-氟 -4-(1-甲基-1H-吡唑-4- 基)苯基)氨基)-1-(四氢呋喃-3基)-6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶- 5(4H)-基)乙酮。基因泰克的科学家报告发现一种CREB结合蛋白（CBP）布罗莫结构域的体内探针。应用一种限制功能的多元组件筛选CBP后发现GNE-272。该化合物的CBP的IC50 = 0.021 mcM, CBP BRET 细胞的l IC50 = 0.41 mcM ，BRD4的IC50 = 12 mcM。GNE-272在MOLM-16急性髓性白血病移植瘤中显示了疗效，在一个MycMOLM-16药代动力学/药效动力学模型中显示了活性，可以降低Myc的转录水平，其分子式如下：

。

发明内容

所述GNE-272（Ⅵ）的制备方法，包括下列步骤：

。

GNE-272是由化合物Ⅰ和Ⅱ经两步取代、脱保护、乙酰化得到的。由Ⅰ和Ⅱ制备Ⅲ时，反应溶剂选用四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、DMSO、三氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷。缚酸剂为三乙胺、吡啶、碳酸钾、碳酸钠。投料比为化合物Ⅰ：化合物Ⅱ:缚酸剂的摩尔比为1.0:1.0-1.5:0.5-1.2。反应温度为50℃-140℃。

由Ⅲ制备Ⅴ时，反应溶剂选用乙腈、THF、丙酮、N,N-二甲基甲酰胺、DMSO、1,4-二氧六环。缚酸剂用三乙胺、碳酸钠、碳酸钾。投料比为化合物Ⅲ：化合物Ⅳ：缚酸剂=1.0:1.1-2.0:0.8-1.5。反应温度为50℃-140℃。

由Ⅴ制备Ⅵ时，脱保护步骤中，脱保护剂选用三氟乙酸、稀盐酸，溶剂选用二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯，反应温度15℃-45℃。

由Ⅴ制备Ⅵ时，反应溶剂选用四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、DMSO、三氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷中。乙酰化试剂选用乙酸酐、乙酰氯。缚酸剂为三乙胺、吡啶、碳酸钾、碳酸钠。投料比为化合物Ⅴ：乙酰化试剂:缚酸剂的摩尔比为1:1.0-1.5:0.5-1.0。反应温度为0℃-40℃。

本方法旨在得到一条操作简便，收率高，杂质少，操作简便，对人体危害小，实用价值高的GNE-272的制备方法。

具体实施实例

以下结合实例对本方法进行更详细的描述，但不作为对本方法的限制。

实例1：化合物Ⅲ的制备

在250mL三口瓶中加入化合物Ⅰ（20.0g 0.07mol）、化合物Ⅱ（16.0g 0.08mol）、碳酸钾（9.7g 0.07mol）、DMF(100ml)，加热回流反应3.0h。在反应液中加入200ml二氯甲烷，400ml水萃取，收集有机相。有机相再水洗三次，收集有机相，并加入无水硫酸钠干燥。抽滤，将收集的滤液置于旋转蒸发仪上旋去溶剂，得到25.5g淡黄色固体。加入127.5ml丙酮热打浆2h，搅拌析晶4h，减压抽滤，得到24.8g类白色固体，产率89.5%。

实例2：化合物Ⅴ的制备

在250mL三口瓶中加入化合物Ⅲ（24.0g 0.06mol)、化合物Ⅳ（9.6g 0.09mol)、DMSO（120ml）、碳酸钠（9.5g 0.09mol)，加热,100℃反应2h。在反应液中加入50ml乙酸乙酯，100ml水萃取，收集有机相。有机相再水洗三次，收集有机相，并加入无水硫酸钠干燥。抽滤，将收集的滤液置于旋转蒸发仪上旋去溶剂，得到27.8g类白色固体。加入83.4ml甲醇热打浆3h，搅拌析晶4h，减压抽滤，得到26.5g白色固体，产率94.0%。

实例3：化合物Ⅵ的制备

在250mL三口瓶中加入化合物Ⅴ（26.0g 0.06mol)、DCM（320ml）、三氟乙酸（7.5g 0.066mol)，常温搅拌反应1h。反应液用饱和碳酸氢钠溶液调PH至7-8，转移至分液漏斗，分液收集有机相，加入无水硫酸钠干燥。进行减压抽滤，将滤液置于旋转蒸发仪上旋去溶剂，得到20.0g黄色固体。加入DMF(80ml)、乙酰氯（4.7g 0.06mol）、三乙胺（6.0g 0.06mol），常温反应5h，将反应液置于旋转蒸发仪上旋去溶剂，得到21.2g类白色固体。加入异丙醇（212ml），热打浆2h，冰水浴析晶6h，减压抽滤，得到19.8g白色固体，产率83.9%。