[发明专利]一种提高免疫检测系统灵敏性的方法及使用该方法的装置

说明书

技术领域

本发明涉及生物检测领域，特别是涉及一种提高免疫检测系统灵敏性的方法及使用该方法的装置。

背景技术

1959年，Yalow和Berson将放射性同位素示踪与免疫反应相结合建立了放射免疫分析法，开创了免疫分析这一崭新的领域，被公认为痕量分析化学方面的重大突破。此后，一系列免疫分析方法纷纷涌现并不断发展，如酶联免疫吸附法、荧光免疫测定法、免疫层析测定法、免疫传感器测定法等。免疫检测技术正朝着定量、多组分分析、高灵敏、高特异性、方便快速以及更加经济适用的方向发展。

简单、灵敏、有效的检测技术在疾病诊断、新药开发、生化防御等领域意义重大。目前，已有众多提高检测灵敏性的文献报道。中国专利CN 01822390.7公开了一种检测分析物的测试条测试法，该方法是首先对检测抗体(靶向试剂)进行生物素(配体)化修饰，示踪颗粒标记了抗生物素抗体(标记物)，这样在检测过程中会形成“树枝状”结构，使检测信号得以放大。基于这一原理制备的乙肝表面抗原检测试纸条较Abbott公司的乙肝表面抗原检测试纸条更为灵敏。中国专利CN200880132189公开了一种免疫层析测试中信号放大的方法以及使用该方法的免疫层析试剂盒，该方法采用两种不同粒径的偶联物超灵敏检测靶物质的信号方法，也是采用了树枝状信号放大技术。

虽然，有诸多提高灵敏性的文献报道。理论上，这些方法能够检测到1个目标抗原的存在，也就是说，只要有一个目标抗原存在，检测信号就能放大到很容易被侦测到的程度(放大到最大)，因而，这些方法都有极高的灵敏度。但是，在实际应用中，不可能避免非特异反应(如：背景信号)的发生，因而，这些方法在实际应用中无法区分阴阳性，最终的结果是所有的样品都为阳性，因而，这些方法没有实际应用价值。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是在保证特异性不降低的前提下，提供一种提高免疫检测系统灵敏性的方法，用于目标物质的高灵敏检测。

本发明所要解决的技术问题通过以下技术方案予以实现：

一种提高免疫检测系统灵敏性的方法，其特征在于，该免疫检测系统包括位于固相上的抗小分子抗体、小分子标记的捕获抗体和信号标记的检测抗体，检测时形成树枝状的“信号标记的检测抗体-目标抗原-小分子标记的捕获抗体-目标抗原-信号标记的检测抗体-目标抗原-小分子标记的捕获抗体……”复合物，所述抗小分子抗体将该复合物固定于检测区域。

进一步地，所述小分子是任意一种能对抗体进行标记的化学分子。

进一步地，所述小分子是异硫氰酸荧光素、生物素、或地高辛中的一种。

进一步地，所述信号标记是颗粒标记或酶标记。

进一步地，所述抗小分子抗体为抗生物素抗体。

进一步地，所述捕获抗体与小分子之间的偶联比为1∶5～1∶40。

进一步地，所述目标抗原为蛋白质、多糖、微生物或核酸等任意一种可被抗体分子特异性结合的物质。

本发明还提供一种免疫层析试纸条，其特征在于，试纸条包括依次搭接粘贴于底板上的样品垫、结合垫、层析膜、吸水纸；其中，层析膜上检测线处包被有抗小分子抗体，结合垫上含有小分子标记的捕获抗体和颗粒标记的检测抗体。

一种免疫层析试纸条，其特征在于，试纸条包括依次搭接粘贴于底板上的样品垫、结合垫1、结合垫2、层析膜、吸水纸；结合垫1和结合垫2上分别含有小分子标记的捕获抗体和颗粒标记的检测抗体。

一种免疫层析试纸条，其特征在于，试纸条包括依次搭接粘贴于底板上的样品垫、层析膜、吸水纸；检测样品时，将小分子标记的捕获抗体和颗粒标记的检测抗体与样品混合，添加到样品垫上进行检测。

一种免疫渗滤卡，其特征在于，渗滤卡检测点上包被有抗小分子抗体；检测样品时，将小分子标记的捕获抗体和颗粒标记的检测抗体与样品混合，添加到免疫渗滤卡加样孔中进行检测。

本发明具有如下有益效果：

本发明在检测时形成树枝状的“信号标记的检测抗体-目标抗原-小分子标记的捕获抗体-目标抗原-信号标记的检测抗体-目标抗原-小分子标记的捕获抗体……”复合物，固相上的抗小分子抗体将该复合物固定于检测区域，从而给出了良好的信号放大效果，大大提高了灵敏度。较现有信号放大技术相比，优势在于仅在目标抗原存在的情况下，检测信号才会得到增强。这样，在保证特异性的同时，保证了检测的高灵敏性。同样，该方法的使用使得可以制造出高灵敏度的免疫层析试试纸条和免疫渗滤卡。

说明书附图

图1为本发明信号放大原理图。