[发明专利]一种用于提取植物RNA的试剂盒以及提取方法

权利要求书

1.一种植物RNA的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）取0.1 g的植物材料于研钵中，液氮充分研磨成粉末，装入1.5 mL的离心管中，加入800~1000 uL的溶液 A，充分混匀，65℃ 金属浴15~20 min，每3~5 min摇匀一次，13000 rpm离心5 min；

（2）取上清于1.5 mL的离心管中，加入0~1/2体积且不为0的溶液 B，充分混匀，-20℃放置10 min；4℃、13000 rpm 离心10 min；

（3）取上清液，加入1/2体积的溶液 C，充分混匀，-20℃放置5 min；4℃、13000 rpm 离心10 min；

（4）取上清于2 mL的离心管中，加入等体积的溶液 D，充分混匀，4℃、13000 rpm 离心10 min；

（5）取上清，加入等体积的溶液 E，-20℃放置10 min；4℃、13000 rpm 离心15 min；

（6）弃上清，用溶液F洗涤沉淀2次，离心，用枪头尽可能去残液，室温放置3 min，使残留的酒精挥发，加入30~80 uL的DEPC H₂O；

溶液A：1~2% SDS、10~100 mM EDTA pH 8.0、0.1~1M Tris-HCl pH 7.0~8.0、0.5~2 MNaCl和1~10% β-巯基乙醇；

溶液B：3~7 M KAC；

溶液C：水饱和酚；

溶液D：体积比为24：1的氯仿和异戊醇；

溶液E：异丙醇；

所述溶液F为含有75%乙醇；

所述植物样品为铁皮石斛。