[发明专利]提升克雷伯氏肺炎杆菌生产α-酮异戊酸的方法及改造菌有效
| 申请号： | 201710135301.9 | 申请日： | 2017-03-08 |
| 公开（公告）号： | CN108570438B | 公开（公告）日： | 2020-06-30 |
| 发明（设计）人： | 郝健;顾金杰;史吉平;姜标 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海高等研究院 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12P7/40;C12R1/22 |
| 代理公司： | 上海硕力知识产权代理事务所(普通合伙) 31251 | 代理人： | 刘红梅 |
| 地址： | 201203 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 提升 克雷伯氏 肺炎 杆菌 生产 戊酸 方法 改造 | ||
1.改造的克雷伯氏肺炎杆菌，其特征在于：所述改造的克雷伯氏肺炎杆菌为乙酰乳酸脱羧酶和吲哚-3-丙酮酸脱羧酶同时失活的克雷伯氏肺炎杆菌；或者吲哚-3-丙酮酸脱羧酶、乙酰乳酸脱羧酶和乳酸脱氢酶同时失活的克雷伯氏肺炎杆菌。
2.改造的克雷伯氏肺炎杆菌生产α-酮异戊酸的方法，该方法为：所述改造的克雷伯氏肺炎杆菌为乙酰乳酸脱羧酶失活的克雷伯氏肺炎杆菌；或者乙酰乳酸脱羧酶和乳酸脱氢酶同时失活的克雷伯氏肺炎杆菌；或者乙酰乳酸脱羧酶和吲哚-3-丙酮酸脱羧酶同时失活的克雷伯氏肺炎杆菌；或者吲哚-3-丙酮酸脱羧酶、乙酰乳酸脱羧酶和乳酸脱氢酶同时失活的克雷伯氏肺炎杆菌；将所述改造的克雷伯氏肺炎杆菌接种到碳源培养基中进行发酵培养，发酵过程中菌体将培养基中的碳源转化成α-酮异戊酸；所述改造的克雷伯氏肺炎杆菌发酵培养的条件为：发酵温度为25-45℃，发酵过程中供氧，保持发酵过程中发酵液的pH值在5.5-8.5之间。
3.如权利要求2所述的改造的克雷伯氏肺炎杆菌生产α-酮异戊酸的方法，其特征在于，所述改造的克雷伯氏肺炎杆菌发酵培养的条件为：发酵温度为30-40℃，发酵过程中微量供氧，保持发酵过程中发酵液的pH值在6.5-7.5之间。
4.如权利要求2所述的改造的克雷伯氏肺炎杆菌生产α-酮异戊酸的方法，其特征在于：发酵过程中待碳源消耗至1-20g/L时流加碳源进行补料发酵。
5.如权利要求2所述的改造的克雷伯氏肺炎杆菌生产α-酮异戊酸的方法，其特征在于，所述发酵培养基的组成包括：碳源10-200g/L，氮源1-50g/L，无机盐0-10g/L；所述碳源选自葡萄糖、甘油、木糖、生物质水解液中的一种或多种；所述氮源选自玉米浆、酵母提取物、蛋白胨、豆饼粉、尿素、氨、铵盐、硝酸盐、亚硝酸盐；所述无机盐选自钾盐、镁盐、钙盐、磷酸盐。
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