[发明专利]复合基因载体及其应用

说明书

本发明涉及一种复合基因载体及其应用。该复合基因载体由CDG2和脂质体复合而成，所述CDG2和脂质体的质量比为1‑5:1，所述CDG2是通过在α‑环糊精的外部接枝PAMAM‑G2制备得到。本发明的复合基因载体，能够显著提高细胞转染率，有利于推动基因治疗药物的发展。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，特别是涉及一种复合基因载体及其应用。

背景技术

随着21世纪蛋白组学、生物技术、化学基因组学迅猛发展，基因治疗已成为生命科学领域的一个研究热点。目前，肿瘤、心血管疾病等领域的常规治疗尚缺乏有效药物，因此，从基因水平上进行疾病治疗已成为医学领域的一个研究热点。而在基因治疗过程中，需要将外源基因引入到细胞中,但是DNA分子通常以带负电的疏松状态存在,体积较大,满负电荷与细胞表面之间存在排斥作用,很难进入细胞中，另外DNA会被体内的核酸酶降解,在未进入靶细胞,甚至未达到靶器官时便降解成小分子核苷酸,从而失去治疗作用，所以为了基因治疗的高效率，要求在体内运输过程中治疗基因需得到更好的保护，因此基因载体应运而生，将目的基因与载体结合，使得外源基因或有功能的核酸片段导入到细胞中，实现基因表达调控、基因功能甚至基因治疗的目的。开发高效的基因载体对于整个基因治疗乃至基因工程中都是极为重要的一环，也将推动基因治疗向常规治疗的过渡。基因载体的效率可用细胞转染率及编码外源蛋白的表达量来表示,只有高转染效率的载体才是能真正应用于基因治疗过程中，因此开发高转染效率的载体是基因治疗研究中一个重点。

目前基因载体分病毒载体和非病毒载体两种。病毒载体转染效率很高，但是存在如免疫原性等严重的安全性问题，而且搭载目的基因容量小，制备复杂，费用昂贵。非病毒载体免疫原性低、低毒、制备简便且适合大规模生产，但是普遍转染效率都较低。

脂质体载体(如DC-Chol-DOPE、DOSPER-DOPE、DOTMA-DOPE和Lipofectamine^TM2000等等)是非病毒载体中研究比较深入的一类载体，阳离子脂质体因其操作简便，转染的安全性、高效性和通用性而得到广泛应用且已有产品应用于临床试验。Lipofectamine^TM2000(以下简称为Lipo 2000)是脂质体载体的一个典型代表，是现在商品化载体中的明星产品，可为517种细胞提供高转染效率(表达转基因细胞的百分数)和活性(细胞抽提物中转入基因的酶产物活性)。Lipo 2000转染步骤简单便捷，对很多细胞的转染效率也较高。但是Lipo2000的高转染效率并非能针对所有细胞，对于一些细胞它的转染效率并不能达到治疗研究过程所满意的结果。