[发明专利]一种PF1022A的分离纯化方法有效
申请号: | 201710123491.2 | 申请日: | 2017-03-03 |
公开(公告)号: | CN106749569B | 公开(公告)日: | 2021-10-15 |
发明(设计)人: | 杨久林;郭明;刘省伟;张宏福;袁建栋 | 申请(专利权)人: | 重庆乾泰生物医药有限公司;博瑞生物医药(苏州)股份有限公司 |
主分类号: | C07K14/37 | 分类号: | C07K14/37;C07K1/30 |
代理公司: | 苏州锦尚知识产权代理事务所(普通合伙) 32502 | 代理人: | 滕锦林 |
地址: | 400700 重庆市北碚区城*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 pf1022a 分离 纯化 方法 | ||
1.一种PF1022A的分离纯化方法,包括以下步骤:
1)向发酵液中加入助滤剂、搅拌,板框压滤得到菌丝渣;
2)用极性溶剂浸提菌丝渣,过滤,得到浸提液;其中,所述的极性溶剂为甲醇、乙醇、乙酸乙酯或其中任意混合溶剂;
3)将浸提液浓缩至无极性溶剂流出,加入萃取溶剂进行萃取;
4)将得到的萃取有机相进行浓缩,得到浓缩浸膏粗品A;
5)将粗品A用极性溶剂结晶得到PF1022A晶体;其中,所述的极性溶剂为甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、异丙醇或其中任意的混合溶剂;所述极性溶剂用量为每克粗品A使用2-30ml极性溶剂。
2.根据权利要求1所述的方法 ,其特征在于步骤1)中所述的助滤剂为珍珠岩或硅藻土。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于步骤2)中所述的极性溶剂加入量为每千克菌丝渣使用2~5L极性溶剂。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于步骤3)中所述的萃取溶剂为乙酸乙酯、乙酸丁酯或二氯甲烷。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于步骤3)和4)中所述的浓缩为减压旋转蒸发。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于所述的结晶时的温度控制在2~10℃,结晶时间为2~16h。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于步骤5)还包括结晶后,用冰的结晶溶剂进行淋洗所得PF1022A晶体。
8.根据权利要求1~6任一项所述方法,其特征在于,还进一步包括步骤6):将步骤5)得到的晶体干燥,得到PF1022A精粉。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于将步骤5)和/或步骤6)重复操作一次或多次。
10.根据权利要求8所述的方法,其特征在于步骤6)所述的干燥为真空干燥,温度控制在30~40℃,干燥时间为2~16h。
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