[发明专利]用于检测人类CYP2C19基因多态性的引物、探针、试剂盒及方法

权利要求书

1.一种用于检测人类CYP2C19基因多态性的引物和探针组合，其中引物序列如序列1-4所示，探针序列如序列5-8所示，引物序列1-2以及探针序列5-6用于检测CYP2C19*2基因的多态性，引物序列3-4以及探针序列7-8用于检测CYP2C19*3基因的多态性。

2.根据权利要求1所述的引物和探针组合，其中探针的5’端有FAM或VIC修饰，3’端有NFQ-MGB修饰。

3.根据权利要求1或2所述的引物和探针组合，其中每条引物的浓度为300nM，每条探针的浓度为200nM。

4.一种用于检测人类CYP2C19基因多态性的试剂盒，其包含权利要求1-3中任一项所述的引物和探针组合。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其中还包含阳性对照液和空白对照液，所述阳性对照液为分别含有三种不同CYP2C19*2等位基因和两种不同CYP2C19*3等位基因的五种细胞系DNA，所述空白对照液为TE缓冲液。

6.权利要求1-3中任一项所述的引物和探针组合在制备检测人类CYP2C19基因多态性试剂盒中的应用。

7.权利要求1-3中任一项所述的引物和探针组合，或者权利要求4或5所述的试剂盒在检测人类CYP2C19基因多态性中的应用。

8.一种检测人类CYP2C19基因多态性的方法，其包含以下步骤：

(1)获取待测样品基因组DNA、直接使用待测血液样品、或者直接使用待测滤纸干血片样品；

(2)采用权利要求1-3中任一项所述的引物和探针组合，或者采用权利要求4或5所述的试剂盒，以步骤(1)中获取的基因组DNA、血液样品或者滤纸干血片样品为模板，进行荧光PCR扩增；

(3)收集荧光信号，将数据结果导入TaqMan Genotyper软件中进行分析。

9.根据权利要求8所述的方法，其中直接使用待测血液样品或者待测滤纸干血片样品为模板进行荧光PCR扩增。

10.根据权利要求8或9所述的方法，其中每条引物的浓度为300nM，每条探针的浓度为200nM，荧光PCR反应程序为：50℃预处理3分钟，95℃预变性15分钟，预变性后按照以下程序进行40个循环：95℃15秒，60℃32秒；50℃数据读取1分钟；如果模板为血液样品或者滤纸干血片样品，则将循环数增至45。