[发明专利]一种含有(肼基羰基)二茂铁配体的铱配合物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种含有(肼基羰基)二茂铁配体的铱配合物，其结构式为：

2.一种如权利要求1所述的含有(肼基羰基)二茂铁配体的铱配合物的制备方法，其特征在于由以下步骤组成：

(1)氯桥二聚体的制备

在氮气保护下，将IrCl₃·3H₂O和2-苯基苯并噻唑加入2-乙氧基乙醚与水的混合溶剂中，IrCl₃·3H₂O和2-苯基苯并噻唑的摩尔比为1:2～2.5，加热至回流，搅拌反应15～24h后停止反应，冷却至室温，抽滤得到沉淀，所得沉淀分别用二次去离子水、乙醇、正己烷洗涤，真空烘干，得到氯桥二聚体；

(2)4’-甲基-2,2’-联吡啶-4-(肼基羰基)二茂铁的制备

在无水无氧条件下，将4’-甲基-2,2’-联吡啶-4-甲酸加入二氯亚砜溶剂中，加热至回流，搅拌2～4h后停止反应，将溶剂旋蒸除去，将剩余固体溶于无水二氯甲烷中，在冰浴条件下逐滴加入溶有摩尔比为1：1～1：3.5的(肼基羰基)二茂铁和三乙胺的无水二氯甲烷溶液，4’-甲基-2,2’-联吡啶-4-甲酸与(肼基羰基)二茂铁的摩尔比为1:1～3，滴加完成后冰浴下搅拌2～4h后停止反应，恢复至室温，旋蒸除去溶剂，再用硅胶柱层析分离，采用二氯甲烷和甲醇作为展开剂进行纯化，除去溶剂干燥后得到4’-甲基-2,2’-联吡啶-4-(肼基羰基)二茂铁；

(3)铱配合物的合成

在氮气保护下，将氯桥二聚体和4’-甲基-2,2’-联吡啶-4-(肼基羰基)二茂铁按照摩尔比为1:2～5的比例混合加入二氯甲烷溶剂中，加热至35～45℃，搅拌反应15～24h后停止反应，冷却到室温，旋蒸除去溶剂，再用硅胶柱层析分离，采用二氯甲烷和甲醇作为展开剂进行纯化，除去溶剂干燥后得到含有(肼基羰基)二茂铁配体的铱配合物。

3.如权利要求1所述的含有(肼基羰基)二茂铁配体的铱配合物作为荧光探针用荧光法检测生物及细胞中的次氯酸根含量的应用。

4.如权利要求3所述的用途，其特征在于用荧光法检测生物及细胞中的次氯酸根含量的方法由以下步骤组成：

(1)配制pH为7.4、浓度为25mmol的PBS-无水乙醇缓冲溶液，再配制浓度为50μmol的含有(肼基羰基)二茂铁配体的铱配合物的乙醇溶液和浓度为4mmol的标准次氯酸水溶液；

(2)将PBS-无水乙醇缓冲溶液与含有(肼基羰基)二茂铁配体的铱配合物的乙醇溶液按照体积比为5～10:1添加到另一个干净的荧光比色皿中，向其中分别加入0、10、20、30、40、50μL的标准次氯酸水溶液，用荧光分光光度仪分别测定其在波长为566nm处对应的荧光强度I，激发波长为365nm，狭缝为10nm/10nm，以荧光比色皿中次氯酸的浓度为横坐标，以其所对应的荧光强度I为纵坐标，绘制次氯酸浓度的工作曲线，所得线性回归方程为：I-I₀＝1.14+22.56C，I₀为加入0μL的标准次氯酸水溶液时对应的荧光强度，C为标准次氯酸水溶液的浓度，μmol/L；

(3)将PBS-无水乙醇缓冲溶液与含有(肼基羰基)二茂铁配体的铱配合物的乙醇溶液按照体积比为5～10:1添加到另一个干净的荧光比色皿中，用微量进样器吸取待测次氯酸水溶液，加入到该荧光比色皿中，用荧光分光光度仪上测定其在波长为566nm处对应的荧光强度I_待测，激发波长为365nm，狭缝为10nm/10nm，将测得的荧光强度I_待测代入步骤(2)的线性回归方程中，从而待测次氯酸水溶液的浓度为C_待测。

5.如权利要求4所述的用途，其特征在于：所述PBS-无水乙醇缓冲溶液中无水乙醇的体积浓度为28％。