[发明专利]一种氯霉素半抗原及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种氯霉素半抗原，其特征在于，其分子结构式为：

2.一种如本发明第一个方面所述的氯霉素半抗原的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，取氯霉素，加入叔丁基二甲基氯硅烷、咪唑和无水N，N-二甲基甲酰胺，室温反应完全，纯化，得到TBS-氯霉素，其分子结构式如式(2)所示，其中氯霉素、叔丁基二甲基氯硅烷、咪唑和无水二甲基甲酰胺的用量比为：1g︰700-800mg︰300-500mg︰3-7mL；

步骤2，取TBS-氯霉素，加入二氯甲烷溶解，加入丁二酸酐、4-二甲氨基吡啶和三乙胺，室温反应完全，纯化，得到含琥珀酰基-TBS-氯霉素，其分子结构式如式(3)所示，其中TBS-氯霉素、丁二酸酐、4-二甲氨基吡啶和三乙胺的用量比为：0.9746g︰0.81-0.83g︰0.24-0.26g︰100-300μL；

步骤3，取含琥珀酰基-TBS-氯霉素，加入吡啶、乙腈和40％HF，冰浴冷却后，室温反应完全，纯化，得到权利要求1所述的氯霉素半抗原，其中含琥珀酰基-TBS-氯霉素、吡啶、乙腈和40％HF的用量比为：954.94mg︰2-4mL︰5-7mL︰1.5-2mL；

3.一种氯霉素抗原，其特征在于，由权利要求1所述的氯霉素半抗原与载体蛋白偶联得到，其分子结构式为：

4.一种制备如权利要求3所述的氯霉素抗原的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤a，取权利要求1所述的氯霉素半抗原，加入无水N，N-二甲基甲酰胺混匀后，加入二环己基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺，室温反应过夜，其中，氯霉素半抗原、二环己基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺的用量比为：0.09mmol︰0.09-0.15mmol︰0.09-0.15mmol；

步骤b，离心，取溶液，将溶液缓慢加入载体蛋白溶液中，所用载体蛋白的量按照半抗原与载体蛋白的摩尔比15-40︰1计；

步骤c，反应完全后，透析，得到氯霉素抗原。

5.一种氯霉素抗体，其特征在于，由权利要求3所述的氯霉素抗原免疫动物制备得到。

6.由权利要求5所述的氯霉素抗体制备的氯霉素酶联免疫试剂盒。

7.权利要求1所述的氯霉素半抗原或权利要求3所述的氯霉素抗原在制备氯霉素抗体中的应用。

8.权利要求5所述的氯霉素抗体或权利要求6所述的氯霉素酶联免疫试剂盒在检测动物源性食品中氯霉素残留的应用。