[发明专利]一种CRISPR/nCas9介导的定点碱基替换在植物中的应用有效
| 申请号： | 201710098892.7 | 申请日： | 2017-02-23 |
| 公开（公告）号： | CN107043779B | 公开（公告）日： | 2020-05-12 |
| 发明（设计）人： | 夏兰琴;孙永伟;赵云德;李晶莹;杜晋鲁 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院作物科学研究所 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H5/00;A01H6/46 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;白艳 |
| 地址： | 100081 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 crispr ncas9 定点 碱基 替换 植物 中的 应用 | ||
1.CRISPR/nCas9系统、脱氨酶、尿嘧啶DNA糖基化酶抑制蛋白和植物基因表达启动子在定点编辑植物基因中的应用；
所述植物基因表达启动子启动CRISPR/nCas9系统中nCas9核酸酶、脱氨酶和尿嘧啶DNA糖基化酶抑制蛋白的表达；
所述脱氨酶为APOBEC1，其编码基因序列为序列1的第4838-5524位；
所述尿嘧啶DNA糖基化酶抑制蛋白的编码基因序列为序列1的第392-688位；
所述nCas9核酸酶的编码基因序列为序列1的第689-4789位；
所述植物基因表达启动子的核苷酸序列为序列1的第5545-7535位；
所述待编辑基因为OsSBEIIb和OsPDS。
2.CRISPR/nCas9系统、脱氨酶和尿嘧啶DNA糖基化酶抑制蛋白在定点编辑植物基因中的应用；
所述脱氨酶为APOBEC1，其编码基因序列为序列1的第4838-5524位；
所述尿嘧啶DNA糖基化酶抑制蛋白的编码基因序列为序列1的第392-688位；
所述待编辑基因为OsSBEIIb和OsPDS。
3.由nCas9核酸酶、脱氨酶和尿嘧啶DNA糖基化酶抑制蛋白组成的融合蛋白、待编辑基因的sgRNA和植物基因表达启动子在定点编辑植物基因中的应用；
所述植物基因表达启动子驱动由所述nCas9核酸酶、所述脱氨酶和所述尿嘧啶DNA糖基化酶抑制蛋白组成的融合蛋白的编码基因的表达；
所述脱氨酶为APOBEC1，其编码基因序列为序列1的第4838-5524位；
所述尿嘧啶DNA糖基化酶抑制蛋白的编码基因序列为序列1的第392-688位；
所述nCas9核酸酶的编码基因序列为序列1的第689-4789位；
所述植物基因表达启动子的核苷酸序列为序列1的第5545-7535位；
所述待编辑基因为OsSBEIIb和OsPDS；
所述sgRNA的核苷酸序列为序列1第7785-8268位或序列2第7785-8268位或序列3第7785-8268位。
4.由nCas9核酸酶、脱氨酶、连接所述nCas9核酸酶与所述脱氨酶的连接肽和尿嘧啶DNA糖基化酶抑制蛋白组成的融合蛋白、待编辑基因的sgRNA和植物基因表达启动子在定点编辑植物基因中的应用；
所述植物基因表达启动子驱动由所述nCas9核酸酶、所述脱氨酶、所述连接肽和所述尿嘧啶DNA糖基化酶抑制蛋白组成的融合蛋白的编码基因的表达；
所述脱氨酶为APOBEC1，其编码基因序列为序列1的第4838-5524位；
所述尿嘧啶DNA糖基化酶抑制蛋白的编码基因序列为序列1的第392-688位；
所述nCas9核酸酶的编码基因序列为序列1的第689-4789位；
所述连接肽的编码基因序列为序列1的第4790-4837位；
所述植物基因表达启动子的核苷酸序列为序列1的第5545-7535位；
所述融合蛋白的编码基因序列为序列1的第392-5524位；
所述待编辑基因为OsSBEIIb和OsPDS；
所述sgRNA的核苷酸序列为序列1的第7785-8268位或序列2的第7785-8268位或序列3的第7785-8268位。
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