[发明专利]一种对香豆酸-3-羟化酶及其编码基因与应用有效
| 申请号： | 201710098484.1 | 申请日： | 2017-02-21 |
| 公开（公告）号： | CN106906189B | 公开（公告）日： | 2020-10-23 |
| 发明（设计）人： | 汪仁;李宜奎;钱彬彬;徐晟;李晓丹;程丽;夏冰 | 申请（专利权）人： | 江苏省中国科学院植物研究所 |
| 主分类号： | C12N9/02 | 分类号： | C12N9/02;C12N15/53;C12P7/42 |
| 代理公司： | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人： | 李冉 |
| 地址： | 211225 江苏省南京市溧水县*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 香豆酸 羟化酶 及其 编码 基因 应用 | ||
1.一种对香豆酸-3-羟化酶，其特征在于，所述的对香豆酸-3-羟化酶为氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示的蛋白质。
2.编码权利要求1所述的对香豆酸-3-羟化酶的多核苷酸，其特征在于，该多核苷酸的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。
3.一种载体，其特征在于，它含有权利要求2所述的多核苷酸。
4.权利要求3所述的载体的用途，其特征在于：
(a)表达权利要求1所述的对香豆酸-3-羟化酶；或
(b)抑制权利要求1所述的对香豆酸-3-羟化酶的表达；或
(c)抑制权利要求2所述的多核苷酸的表达。
5.一种宿主细胞，其特征在于，它含有权利要求3所述的载体或基因组中整合有权利要求2所述的多核苷酸。
6.权利要求1所述的对香豆酸-3-羟化酶的用途，其特征在于，催化对香豆酸合成咖啡酸。
7.一种表达构建物，其特征在于，所述表达构建物包括以下酶的基因表达盒：(a)权利要求1所述的对香豆酸-3-羟化酶；和
(b)细胞色素P450还原酶。
8.一种宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞中包括权利要求7所述的表达构建物。
9.如权利要求8所述的一种宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞是原核宿主细胞或真核宿主细胞；所述的原核宿主细胞为大肠杆菌、枯草杆菌、运动假单胞菌或乳酸菌，所述的真核宿主细胞为真菌细胞、植物细胞、昆虫细胞或哺乳动物细胞；所述的真菌细胞为酵母细胞。
10.如权利要求8所述的一种宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞是包含有对香豆酸-3-羟化酶的底物的细胞。
11.如权利要求8所述的一种宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞是内源存在对香豆酸的细胞。
12.权利要求7所述的表达构建物或权利要求8-11任一项所述的宿主细胞的用途，其特征在于，催化对香豆酸合成咖啡酸。
13.一种生产咖啡酸的方法，其特征在于，利用权利要求1所述的对香豆酸-3-羟化酶生产咖啡酸；所述的方法包括：以权利要求3所述的载体或权利要求7所述的表达构建物转化宿主细胞，培养转化的宿主细胞，合成咖啡酸。
14.如权利要求13所述的一种生产咖啡酸的方法，其特征在于，所述的宿主细胞是原核宿主细胞或真核宿主细胞；所述的原核宿主细胞为大肠杆菌、枯草杆菌、运动假单胞菌或乳酸菌；所述的真核宿主细胞为真菌细胞、植物细胞、昆虫细胞或哺乳动物细胞；所述的真菌细胞为酵母细胞。
15.如权利要求13所述的一种生产咖啡酸的方法，其特征在于，所述宿主细胞是包含有对香豆酸-3-羟化酶的底物的细胞。
16.如权利要求13所述的一种生产咖啡酸的方法，其特征在于，所述宿主细胞是内源存在对香豆酸的细胞。
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