[发明专利]一种高选择性喹诺酮类抗生素分子印迹聚合物的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及食品安全检测领域，具体涉及一种高选择性喹诺酮类抗生素分子印迹聚合物的制备方法。

背景技术

氟喹诺酮类抗生素(Fluoroquinolones，FQs)是一类具有1，4-二氢-4-氧代喹啉-3-羧酸结构的合成化合物。近年来，其主要用于食用性动物疾病的预防和治疗，导致食品样品中出现了氟喹诺酮类抗生素残留的现象，对人类健康造成了危害，例如可引起成人恶心、呕吐、过敏反应和抗生素耐受，以及青少年关节肿胀和疼痛甚至中枢神经系统损伤。所以美国、欧盟、日本等发达国家对该类药物残留提出了严格的限量规定：FDA于1997年明确规定在进口动物源性食品中禁止使用FQs(氟乙酰苯醌)；欧盟委员会EU2377/90号关于建立共同的动物源性食品兽药最大残留检测程序法规中所规定：恩诺沙星和环丙沙星在动物肌肉、肝脏和肾脏中最大药物残留限量(MRL)为30μg/kg，沙拉沙星和双氟沙星在动物组织中MRL分别为l0～100μg/kg和1900μg/kg；日本肯定列表对该类药物残留规定的MRL为50μg/kg。

许多分析方法已被用于食品中氟喹诺酮类抗生素的检测，如荧光光谱法、酶联免疫吸附法、毛细管电泳法和液相色谱法等。由于样品基质复杂且待测物含量低，大部分方法都需要对实际样品进行前处理以净化和浓缩待测物，主要有液-液萃取(LLE)、透析、超临界流体萃取(SFE)、加压液相萃取(PLE)和固相萃取(SPE)。固相萃取由于其具有操作简单、使用灵活、回收率高、处理的样品体积小、易于自动化等优点成为常用的样品前处理方法。然而，其常用的吸附剂由于缺乏选择性，对复杂的环境、生物体系中的样品很难进行分离，所以它的应用在一定程度上受到限制。本课题以氧氟沙星为模板制备了分子印迹聚合物，并将其制备成分子印迹固相萃取柱，建立了恩诺沙星、氧氟沙星、沙拉沙星、双氟沙星、环丙沙星、氟甲喹和萘啶酸多残留分析的在线LC-MS/MS方法。

分子印迹聚合物由于可特异性吸附模板分子而广泛应用于样品前处理。分子印迹聚合物的制备方法有多种，包括：本体聚合法[1]、悬浮聚合法[2]、多步溶胀聚合法[3,4]、沉淀聚合法[5,6]、表面印迹[7]等方法。其中沉淀聚合法将包括模板分子、功能单体、交联剂等在内的聚合物体系溶解于大体积的致孔剂中，最终可形成纳米级的聚合物微球。与传统的本体聚合法相比，沉淀聚合法具有无需碾磨等后续操作、产率高、制得的聚合物微粒较规则等优点，成为制备分子印迹聚合物最重要的方法之一。

虽然有文献报道利用喹诺酮类抗生素作为分子印迹聚合物的模板分子，但是，人们一直未能找到一种能够快速、有效地检测喹诺酮类抗生素并且具有良好抗干扰性能的分子印迹聚合物。

发明内容

本发明提供了一种高选择性喹诺酮类抗生素分子印迹聚合物及相应制备方法，该高选择性分子印迹聚合物具有很高的印因迹子，具有更优的特异性吸附能力。

一种高选择性喹诺酮类抗生素分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于，所述方法包括下述步骤：

步骤1)、在容器中加入第一预定量的致孔剂；

步骤2)、将第二预定量的模板分子、功能单体、交联剂和引发剂溶于所述致孔剂中，获得相应混合溶液；

步骤3)、对所获得的混合溶液进行超声脱气，持续第一预定时间；

步骤4)、对脱气后的混合物进行通氮处理，持续第二预定时间；

步骤5)、对所述容器进行密封；

步骤6)、将所述容器置于第一预定温度环境中；

步骤7)、对容器内的混合物进行持续搅拌；

步骤8)、过滤并收集容器中生成的聚合物微粒。

在一种优选实现方式中，所述方法还包括：

步骤9)、利用有机溶剂对所述聚合物微粒进行索氏提取；

步骤10)、对所得产物进行甲醇式提取。

在另一种优选实现方式中，所述方法还包括：

步骤11)、在恒温条件下对所得产物进行恒温干燥处理。

在另一种优选实现方式中，所述致孔剂为甲醇或甲醇与乙腈的混合溶液。

在另一种优选实现方式中，所述功能单体包括：甲基丙烯酸(Methacrylic acid，MAA)或4-乙烯吡啶(4-Vinylpyridine，4-VP)。

在另一种优选实现方式中，所述第一预定温度为50-70℃。

一种快速检测食品中痕量喹诺酮类抗生素的方法，其特征在于，所述方法包括：