[发明专利]当归四逆汤组合物指纹图谱的建立方法

说明书

本发明公开了当归四逆汤组合物指纹图谱的建立方法，属于中药分析领域。本发明采用高效液相色谱法建立指纹图谱，色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；柱温：25‑35℃；流速：0.9‑1.1ml/min；检测波长：220nm；以乙腈A‑0.1％磷酸溶液B为流动相，按如下顺序梯度洗脱：本发明的指纹图谱全面反映出当归四逆汤的质量信息，从而能够达到更加全面、有效地控制当归四逆汤组合物产品质量的目的。

技术领域

本发明属于中药分析领域，涉及一种中药复方颗粒质量标准检测方法，特别涉及一种当归四逆汤组合物指纹图谱的建立方法。

背景技术

中药汤剂是临床用药的主流，但因起煎煮、携带不方便，煎煮制备的汤剂质量往往因人、因煎煮器具而存在较大差异，而经典名方临床疗效确切，因简、便、验、廉而深受广大消费者喜爱，运用现代科学技术将经典名方开发承携带方便、便于服用的中药制剂，不仅是对中医药的传承，也是更好的促进经典名方的临床应用。颗粒剂制备工艺相对简单、易于赋形，服用、携带方便，在服用形式上与传统汤剂最为一致，能较大限度的保持传统汤剂的特点，因此以汤剂形式服用的经典名方选择颗粒剂最为适宜。颗粒剂的开发应遵循“原汁原味”的原则，在现有技术条件下，首先通过研究制备明确煎煮参数的标准(基准)汤剂，对基准汤剂的关键质量属性进行研究，主要以单处方标准汤剂的固含量(干膏率)、指纹图谱、多指标成分作为质量参比，指导颗粒的研制。研究中为减少不同来源的饮片存在的质量差异对一致性研究带来影响，选择随行对照的方式，采用同一批次的饮片，煎煮至少10份标准汤剂，以其关键质量的均值作为颗粒剂制备工艺参数研制的“基准”。

当归四逆汤出自《伤寒论》，该方原治厥阴伤寒，为素体血虚、寒凝经脉所致之证。该方由当归、桂枝、细辛、白芍、炙甘草、通草(川木通)、大枣组成。当归四逆汤方适应症广泛、功效明确，且现今没有以当归四逆汤原方为基础开发而成的中成药。该方虽已逾千年，但由于其组方严谨、配伍精良、功效卓越等特点，在临床上以其为基本方应用甚为广泛。现有中药饮片及复方汤剂及颗粒的质量标准，一般包括两方面，形态鉴别、理化鉴别和光谱色谱分析等，其中光谱色谱分析通常包括薄层色谱法、高效液相含量测定方法、指纹图谱法等。作为中药复方当归四逆汤，由两味以上药味组成，有相对规定性的加工方法和使用方法，其所含化学成分相对复杂、药理作用具有多靶点多层次的特点，而且多方面干扰因素众多，因此研究难度颇大，且生产上难以做到精确稳定可控。而目前药复方制剂领域在含量控制上基本只有一个或两个指标性成分，质量控制单一，指标少，难以全面反映当归四逆汤产品的质量状况。

发明内容

因此，本发明要解决的技术问题在于克服现有技术中的中药复方制剂在含量控制上基本只有一个或两个指标性成分，质量控制单一，指标少，存在难以全面反映药味多，组分多、靶标多的当归四逆汤组合物的质量状况的缺陷，从而提供当归四逆汤组合物指纹图谱的建立方法。

为此，本发明提供如下技术方案：

当归四逆汤组合物指纹图谱的建立方法，其特征在于，采用高效液相色谱法，色谱条件为：

色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；

柱温：25-35℃；流速：0.9-1.1ml/min；

检测波长：220nm；

以乙腈A-0.1％磷酸溶液B为流动相，按如下顺序梯度洗脱：

所述指纹图谱包括9个共有峰，各峰相对保留时间与参照峰相对保留时间比值分别为：1号峰相对保留时间RRT为0.31，2号峰相对保留时间RRT为0.72，3号峰相对保留时间RRT为0.81，4号峰相对保留时间RRT为0.90，5号峰相对保留时间RRT为1.00，6号峰相对保留时间RRT为1.38，7号峰相对保留时间RRT为1.72，8号峰相对保留时间RRT为1.80，9号峰相对保留时间RRT为1.97，其中5号S峰是参照物的色谱峰。