[发明专利]快速检测唾液DNA中微生物污染的试剂、试剂盒与其应用在审
| 申请号： | 201710083713.2 | 申请日： | 2017-02-16 |
| 公开（公告）号： | CN106916889A | 公开（公告）日： | 2017-07-04 |
| 发明（设计）人： | 魏冬凯;丁国徽;刘佳 | 申请（专利权）人： | 苏州贝斯派生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/10;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙)32256 | 代理人： | 王锋 |
| 地址： | 215000 江苏省苏州市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 快速 检测 唾液 dna 微生物 污染 试剂 试剂盒 与其 应用 | ||
1.一种快速检测唾液DNA中微生物污染的试剂，其特征在于包含具有SEQ ID NO：1所示序列的第一引物和具有SEQ ID NO：2所示序列的第二引物。
2.根据权利要求1所述的快速检测唾液DNA中微生物污染的试剂，其特征在于包括浓度为0.5uM～5uM的第一引物、浓度为0.5uM～5uM的第二引物，其余部分包含超纯水；
和/或，所述快速检测唾液DNA中微生物污染的试剂的pH值为8.0～9.0。
3.根据权利要求2所述的快速检测唾液DNA中微生物污染的试剂，其特征在于包括浓度为1uM的第一引物、浓度为1uM的第二引物，其余部分包含超纯水；
和/或，所述快速检测唾液DNA中微生物污染的试剂的pH值为8.5。
4.一种快速检测唾液DNA中微生物污染的试剂盒，其特征在于包括权利要求1-3中任一项所述的快速检测唾液DNA中微生物污染的试剂。
5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于还包括PCR扩增检测的常规组件，所述PCR扩增检测的常规组件包括TaqDNA聚合酶、PCR缓冲液、脱氧核糖核苷三磷酸混合物和超纯水。
6.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于还包括阴性对照物和阳性对照物。
7.一种唾液DNA中微生物污染的快速检测方法，其特征在于包括：
提供权利要求1-3中任一项所述的快速检测唾液DNA中微生物污染的试剂或权利要求4-6中任一项所述的试剂盒；
将待检测的唾液DNA样品，所述快速检测唾液DNA中微生物污染的试剂以及PCR扩增检测的常规组件混合均匀，之后进行PCR扩增。
8.根据权利要求7所述的唾液DNA中微生物污染的快速检测方法，其特征在于，所述待检测唾液DNA样品与快速检测唾液DNA中微生物污染的试剂的体积比为1uL～5uL:15uL～25uL。
9.根据权利要求7所述的唾液DNA中微生物污染的快速检测方法，其特征在于，所述PCR扩增的条件包括：
预扩增，包括：在90℃～100℃温度条件下反应1min～5min；
PCR循环，包括：
首先进行10～30个循环，每个循环包括：依次在90℃～100℃下保温10s-50s，50℃～72℃下保温10s～50s，65℃～85℃下保温10s～50s；
其后，依次在65℃～85℃下保温1min～5min，4℃保存。
10.根据权利要求9所述的唾液DNA中微生物污染的快速检测方法，其特征在于，所述PCR循环包括：
首先进行20个循环，每个循环包括：依次在95℃下保温30s，55℃下保温30s，72℃下保温30s；
其后，在72℃下保温5min，4℃保存。
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