[发明专利]一种产衣康酸的重组酵母菌株及其构建方法与应用

权利要求书

1.一种产衣康酸的重组酵母菌株，其特征在于：所述重组酵母菌以C.glycerolgenesis CCTCC AB 204047为出发菌株，通过基因工程改造在C.glycerolgenesis基因组中插入顺乌头酸脱羧酶基因表达盒Pgap-CadA-Tgap-zeocin得到的重组酵母菌株。

2.根据权利1所述的重组酵母菌株，其特征在于所述的顺乌头酸脱羧酶表达盒Pgap-CadA-Tgap-zeocin由土曲霉顺乌头酸脱羧酶基因，C.glycerolgenesis甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因启动子和终止子，博来霉素zeocin基因、启动子和终止子组成。

3.根据权利1至2所述的重组酵母菌株，其特征在于：所述土曲霉顺乌头酸脱羧酶基因编码a的蛋白质：

a、由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质。

4.根据权利1至2所述的重组酵母菌株，其特征在于：所述C.glycerolgenesis甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因启动子和终止子分别被连接至编码顺乌头酸脱羧酶的核苷酸序列两端，分别启动和终止顺乌头酸脱羧酶基因的转录。

5.根据权利1至2所述的重组酵母菌株，其特征在于：所述博来霉素zeocin作为表达盒中的抗性筛选标记，该基因的启动子和终止子分别连接在基因序列的两端，分别启动和终止基因的转录。

6.根据权利要求1至5所述产衣康酸的重组酵母菌株的构建方法，其特征在于：通过基因工程改造构建含顺乌头酸脱羧酶表达盒的重组质粒，重组质粒线性化后将其插入C.glycerolgenesis基因组中得到含顺乌头酸脱羧酶表达盒的重组酵母菌株。

7.根据权利要求1至6所述的重组酵母菌株在制备衣康酸中的应用，其特征在于：将所述的重组酵母菌培养于发酵培养基；以及收集该培养基以分离衣康酸。

8.根据权利要求7所述的重组酵母菌株在制备衣康酸中的应用，其特征在于：所述发酵培养基为：50g/L葡萄糖，10g/L酵母粉，20g/L蛋白胨，zeocin 150μg/mL，余量为水。