[发明专利]一种从甘草废渣中快速提取甘草素的方法

说明书

本发明属于中药提取领域，尤其涉及一种从甘草废渣中快速提取甘草素的方法。以碱提酸沉法提取甘草酸后的剩余废渣为原料，超声提取后，降温酶解；酶解液真空抽滤，滤液浓缩至干后，用乙醇溶解，得到浓缩液；将浓缩液注射于CHEETAH中高压快速制备液相色谱柱，分析色谱检测含甘草素浓度最大的馏分及前、后两侧共三个馏分合并，减压浓缩干燥后，得到高纯度甘草素产品。从甘草废渣中快速提取甘草素的方法，该方法操作简单、环保无污染、得到的产品纯度高。

技术领域

本发明属于中药提取领域，尤其涉及一种从甘草废渣中快速提取甘草素的方法。

背景技术

甘草为豆科甘草属植物，其根茎是常用的中草药和经济植物。甘草中含有大量活性成分，具有抗炎、抗变态反应、抗溃疡、抗HIV病毒、抗SARS病毒、抗氧化和抗癌等药理活性；从甘草中提取活性成分甘草酸等萜类产品后，剩余物中主要含有黄酮类化合物，早期作为废渣丢弃。近年来，随着对中药的深入研究，人们发现黄酮类成分也具有重要的药理作用，而甘草黄酮类化合物中主要的活性成分有甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素等。

甘草素是甘草苷的苷元，为白色针状晶体，分子式为C₁₅H₁₂O₄，分子量256.25。据研究报道，甘草中甘草苷含量约为3.6%，而甘草素的含量仅为0.1%左右，有些甘草甚至检测不出该成分，从甘草中直接分离提取高纯度的甘草素十分困难，并且现有技术中公开的提取方法，均存在提取率较低的问题。例如，中国专利CN102112142A，用于提高甘草或甘草提取物中甘草素含量的提取方法，是先用水或有机溶剂提取，配合酸水解提高甘草素含量，不仅提取效率低，而且产物中甘草素的含量较低；中国专利CN102391232B，从甘草中提取甘草素，使用聚酰胺和大孔树脂的混合柱，在一定程度上提高了甘草素的纯度，但纯化后需经两次8小时的析晶过程，才能得到甘草素产品，该操作过程比较繁琐，对工艺参数要求比较严格，不易控制。

综上所述，研究一种可以高效率提取甘草素的提取方法，对于其药物应用十分有必要。

发明内容

针对上述问题，本发明提供从甘草废渣中快速提取甘草素的方法，该方法操作简单、环保无污染、得到的产品纯度高。

为了实现上述目的，本发明提供的从甘草废渣中快速提取甘草素的方法，包括以下步骤。

步骤1、以碱提酸沉法提取甘草酸后的剩余废渣为原料，加入5-10倍体积的蒸馏水，混合均匀后，90℃条件下超声提取2小时；降温至50-60℃后加入原料重量的2-5%的纤维素酶酶解。

步骤2、将酶解液真空抽滤，取滤渣重复步骤1操作两次，将酶解液真空抽滤；合并三次抽滤得到的滤液，浓缩至干后，用1-2倍体积的95%乙醇溶解两次，得到浓缩液。

步骤3、将浓缩液注射于CHEETAH中高压快速制备液相色谱柱，该制备液相色谱配有二元溶剂混合系统、监测系统和馏分自动收集系统，可在不超过10Mpa压力下操作，洗脱流速设定范围为0-100mL/min；本发明所用色谱柱内填充YWG C₁₈和MCI混合固定相，进样体积为3.5-7mL，设定制备色谱仪的检测波长为276nm，洗脱流速5mL/min，洗脱流动相为30%-70%乙醇溶剂，每20分钟自动收集一个馏分，将通过分析色谱检测含甘草素浓度最大的馏分及前、后两侧共三个馏分合并，减压浓缩在60℃下干燥30min-1h后，得到高纯度甘草素产品。

所述步骤1中酶解得温度为50-60℃，酶解时间为4小时。

所述步骤2中浓缩为真空旋转蒸发浓缩，浓缩温度为60℃。

所述步骤3中色谱柱的规格为40g，结构为上粗下细台柱型结构；所述的YWG C₁₈和MCI混合固定相为两种填料顺序填充至色谱柱，体积比为1:2-4，其中YWG C₁₈填料的颗粒粒径为15 μm，MCI颗粒粒径为10 μm。