[发明专利]一种高效杀灭滴虫等医学原虫的细菌培养上清液的制备方法和及其利用

权利要求书

1.一种高效杀灭滴虫等医学原虫的细菌培养上清液的制备方法和及其利用，在自配厌氧菌培养基中添加了促进艰难梭菌生长的营养物质和促进艰难梭菌毒素分泌的成分；

所述厌氧菌自配培养基成分为可溶性淀粉0.8％～1.2％，酵母浸出液0.4％～0.6％，磷酸氢二钠0.08％～0.12％，磷酸二氢钾0.1％～0.2％，维生素B₂ 0.01％～0.02％；

所述促进艰难梭菌生长的营养物质为动物肠上皮水解产物；

所述促进艰难梭菌生长的营养物质动物肠上皮水解产物与蒸馏水的体积比为1:99～5:95；

所述促进艰难梭菌毒素分泌的成分为甲醇；

所述促进艰难梭菌毒素分泌的成分甲醇添加量为10mg～100mg/L。

2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述基础培养基的配方为可溶性淀粉1.0％，酵母浸出液0.5％，磷酸氢二钠0.1％，磷酸二氢钾0.15％，维生素B₂ 0.01％。

3.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述促进艰难梭菌生长的营养物质为动物肠上皮水解产物为动物肠上皮高温高压水解产物，水解反应所需的温度为190度以上200度以下，压力为2个大气压以上。

4.权利要求1-3所述的培养基的制备方法，其特征在于，所述培养基的制备方法包括如下步骤：

(1)采用190度以上200度以下的高温和2个大气压以上压力水解动物肠上皮，动物肠上皮可为鸟类以及哺乳动物肠上皮；

(2)按所述基础培养基的配方称取可溶性淀粉10g/L，酵母浸出液5g/L，磷酸氢二钠0.1g/L，磷酸二氢钾1.5g/L，维生素B₂ 0.1g/L，加入所述促进细菌生长添加液和所述蒸馏水，混匀，121℃高压灭菌25min；所述动物肠上皮水解产物与蒸馏水的体积比为1:99～5:95；

(3)灭菌后放置室温冷却至60℃后添加甲醇50mg。

5.根据权利要求4所述的培养基，其特征在于，所述步骤(2)中所述动物肠上皮水解产物与所述蒸馏水的体积比为1:99。

6.根据权利要求4所述的培养基的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中所述甲醇可以提高艰难梭菌毒素分泌量。

7.根据权利要求1所述的细菌培养上清液含有艰难梭菌毒素A、B以及二元毒素B。

8.根据权利要求1所述的细菌培养上清液，可以杀灭包括医学原虫的原虫类单细胞动物。

9.根据权利要求1所述的细菌培养上清液，可以以原始状态(液态)使用，使用浓度约为1～10％左右水溶液。

10.根据权利要求1所述的细菌培养上清液，可以经过浓缩干燥使用，使用时浓度为10～1000mg/L。

11.根据权利要求1所述的细菌培养上清液，可以经过蛋白盐析、沉淀等精化后使用，使用时浓度为1～100mg/L。

12.根据权利要求1所述细菌培养上清液，所培养细菌为艰难梭菌。

13.根据权利要求12所述艰难梭菌，为艰难梭菌ATCC BAA-1805菌株。

14.根据权利要求9、10、11所述的上清液处理物可添加到外用药物使用。