[发明专利]婴幼儿食品及奶粉中多聚果糖含量的离子色谱法测定方法

权利要求书

1.一种含多聚果糖制品中多聚果糖含量的测定方法，该方法包括：

(1)将含多聚果糖的溶液与淀粉酶接触，得到第一溶液；

(2)将等量的两份第一溶液，分别与葡聚酶/果糖酶复合酶溶液和醋酸盐缓冲液接触，得到第二溶液和第三溶液；

(3)将第二溶液和第三溶液冷却处理；

(4)将步骤(3)冷却处理后的第二溶液和第三溶液稀释，得到稀释液A和稀释液B；以及

(5)采用离子色谱法测试稀释液A中的果糖浓度，稀释液B中的蔗糖浓度和果糖浓度，计算得到多聚果糖的含量。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(4)中，将骤(3)冷却处理后的第二溶液和第三溶液稀释至果糖和/或蔗糖的线性区间是0.5～20μg/mL，然后0.20-0.30μm滤膜过滤，优选采用0.22μm滤膜过滤。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述离子色谱法，流动相：A为H₂O，B为100mM NaOH，C为100mM NaOH+500mM NaHAC；

梯度洗脱条件为：0-20min，A：B：C＝90:10：0；20-25min，A：B：C＝0:0：100；25-50min，A：B：C＝90:10：0。

4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，将含多聚果糖的溶液与淀粉酶在40-80℃，优选60℃水浴振荡25-60分钟，优选30分钟，然后冷却；其中，淀粉酶的用量为：8-9g/L，优选8.33g/L。

5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，所述醋酸盐缓冲液醋酸根离子浓度为0.2mol/l。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述葡聚酶/果糖酶复合酶溶液为含有葡聚酶和果糖酶的醋酸盐缓冲液，其中葡聚酶含量为10-15mg/100ml醋酸盐缓冲液，果糖酶含量为5-10mg/100ml醋酸盐缓冲液。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述葡聚酶/果糖酶复合酶溶液与第一溶液的体积比用量为1:1，所述醋酸盐缓冲液与第一溶液的体积比用量为1:1。

8.根据权利要求1-7任一项所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，将等量的两份第一溶液，分别与葡聚酶/果糖酶复合酶溶液和醋酸盐缓冲液，50-70℃水浴振荡50-70分钟，优选60℃水浴振荡60分钟。

9.根据权利要求1-8任一项所述的方法，其特征在于：

多聚果糖LcFOS的含量由下述公式计算得到

LcFOS＝K×(F-S/1.9)；

其中，K为换算系数，由下述公式计算得到，

在该公式中，n为多聚果糖的平均聚合度；

F为酶解得到的果糖的含量，单位为毫克每百克(mg/100g)，由下述公式计算得到，

c_a为稀释液A中的果糖的浓度，单位为微克每毫升(μg/mL)；

c_b为稀释液B中的果糖的浓度，单位为微克每毫升(μg/mL)；

f为第二溶液和第三溶液的稀释倍数；

m为含多聚果糖的溶液中的固含量，单位为克(g)；

S为蔗糖的含量，单位为毫克每百克(mg/100g)：

$S=\frac{c_s\×f}{1000\×m}\×\frac{20}{10}\×50\×100$

c_s为稀释液B中的蔗糖的浓度，单位为微克每毫升(g/mL)；

f为第三溶液的稀释倍数；

m为含多聚果糖的溶液中的固含量，单位为克(g)。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，当f＝100时，蔗糖含量的计算公式为为：S＝1000cS/m。