[发明专利]一种磁性纳米材料及其制备方法和在富集分析糖基化肽段中的应用

权利要求书

1.一种半胱胺盐酸盐修饰的四氧化三铁磁性纳米材料的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：

（1）称取六水合氯化铁分散于乙二醇中，磁力搅拌混匀，往该混合液中加入无水醋酸钠，继续搅拌混均，超声分散0.5-1小时后，把混合液转移至聚四氟乙烯内衬的不锈钢反应釜中，180-220℃条件下反应14-16小时，随后用去离子水和无水乙醇充分洗涤，在40-60℃下真空干燥，得到四氧化三铁磁性纳米颗粒；

（2）称取步骤（1）所得的四氧化三铁磁性纳米颗粒，分散到磷酸盐缓冲液中，再加入半胱胺盐酸盐，超声分散1-10分钟，30-60℃水浴下机械搅拌1-5小时，在外磁场作用下将产物从反应溶液中磁性分离，用去离子水充分洗涤，在40-60℃下真空干燥，得到半胱胺盐酸盐修饰的四氧化三铁磁性纳米材料。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤（1）中六水合氯化铁、乙二醇和无水醋酸钠的比为（1-5）g：（50-300）mL：（2.5-15）g。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤（2）中四氧化三铁磁性纳米颗粒、磷酸盐缓冲液和半胱胺盐酸盐的比为（1-50）mg：（1-120）mL：（3-200）mg。

4.一种由权利要求1-3之一所述制备方法制备得到的半胱胺盐酸盐修饰的四氧化三铁磁性纳米材料。

5.如权利要求4所述的半胱胺盐酸盐修饰的四氧化三铁磁性纳米材料在富集分析糖基化肽段中的应用，其特征在于，具体步骤如下：

（1）将磁性纳米材料与糖基化肽段溶液加入到乙腈/水/三氟乙酸混合液中混合，在酶解仪中孵育；

（2）在外磁场作用下分离纳米材料，然后用乙腈/水/三氟乙酸混合液洗涤纳米材料；再用乙腈/水/甲酸混合液洗脱材料；

（3）取1-2.5μL洗脱液直接在MALDI-TOF MS的进样靶板上点样，干燥后再点加1-2μL浓度为20mg/mL的2，5-二羟基苯甲酸溶液，形成基质结晶，进行质谱分析。

6. 根据权利要求5所述的应用，其特征在于，步骤（1）中所述的乙腈/水/三氟乙酸混合液中各种组分的体积分数范围为(65-90)%/( 10-34.5)%/(0-0.5)%。

7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，步骤（2）中所述的乙腈/水/三氟乙酸混合液中各种组分的体积分数范围为(65-90)%/(10-34.5)%/(0-0.5)%；所述的乙腈/水/甲酸混合液中各种组分的体积分数范围为(5-45)%/(54.5-95)%/(0-0.5)%。