[发明专利]一种用于人FKBPL蛋白的酶联免疫检测及制备方法

说明书

本发明涉及一种酶联免疫及其检测方法，是一种新的抗人FKBPL蛋白的单抗包被酶标板及酶联免疫试剂盒的制备方法。其关键之处主要在于用基因工程方法制备特异性的鼠抗人FKBP蛋白的单抗，并将此抗体纯化后包被于酶标板上，做为试剂盒的一部分。试剂盒还包括FKBPL的重组蛋白标准品、抗人FKBPL蛋白的多抗、辣根过氧化物酶标记的二抗、样本稀释液、抗体稀释液、显色液、终止液。试剂盒建立了快捷简便测定人血清和血浆中FKBPL蛋白浓度的测定方法。试剂盒主要用于供科学研究和临床实验的研究使用。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体地说涉及一种检测人FKBPL蛋白(FK506结合蛋白类似蛋白)的酶联免疫检测试剂盒。本发明还涉及上述试剂盒的制备方法。

背景技术

FKBPL(FK506-binding protein like)即FK506结合蛋白，与免疫亲和素蛋白家族很相似，能够参与免疫调控以及细胞过程中的蛋白质折叠和运输。FKBPL被认为对射线诱导的抵抗能力方面有潜在的作用，还能够参与到细胞周期的调控中。FKBPL蛋白能够参与对细胞应激的应答，在1999年首次被单独提出来，并命名为DIR1（Robson T. et al. A novelhuman stress response-related gene with a potential role in inducedradioresistance[J]. Radiat Res, 1999, 152, 451-461.）后来又因为它与FKBP蛋白家族的同源性被重新分类，并重新命名为FKBL类似蛋白，并且有研究发现他能够参与新和成的P21蛋白（后来命名为Wisp39蛋白）的稳定合成。（Jascur T. et al. Regulation of p21(WAF1/CIP1) stability by WISp39, a Hsp90 binding TPR protein[J]. Mol Cell,2005, 17, 237-249.）FKBPL蛋白能够与Hsp90、糖皮质激素受体以及肌动蛋白相互作用，从而起到一定的信号传导作用，功能方面跟FKBPs家族蛋白很相似。（McKeen HD. et al. Anovel FK506-like binding protein interacts with the glucocorticoid receptorand regulates steroid receptor signaling[J]. Endocrinology, 2008, 149, 5724-5734.）有研究发现FKBPL蛋白能够影响雌激素受体信号传导，并且对乳腺癌药物tamoxifen的反应有着决定性作用。（McKeen HD. et al. FKBPL regulates estrogen receptorsignaling and determines response to endocrine therapy[J]. Cancer Res, 2010,70, 1090-1100.）罗宾逊等人在1999年发现将L132或者UM-UC-3人膀胱癌细胞中的FKBPL敲除掉，会导致细胞周期的G2、G1和S期减缓，并通过促进DNA单链断裂来增加细胞对x射线的抵抗能力。（Robson T. et al. A novel human stress response-related gene with apotential role in induced radioresistance[J]. Radiat Res, 1999, 152, 451-461.）Valentine等人在2011年发现全长的FKBPL的表达会抑制HMEC-1细胞的迁移，血小管以及体内外微血管的形成。（Valentine A. et al. FKBPL and peptide derivatives:novel biological agents that inhibit angiogenesis by a CD44-dependentmechanism[J]. Clin Cancer Res, 2011, 17, 1044-1056.）McKeen等人通过基因芯片技术发现FKBPL的高表达与乳腺癌患者存活率之间存在高度相关性，FKBPL的药物研发也深入到癌症I期的研究中。