[发明专利]凝血酶抗体、其抗原结合片段及医药用途

说明书

本发明涉及凝血酶抗体、其抗原结合片段及医药用途。进一步地，本发明涉及包含所述凝血酶抗体CDR区的嵌合抗体、人源化抗体，以及包含凝血酶抗体及其抗原结合片段的药物组合物，以及其作为抗凝药物的用途。特别地，本发明涉及一种人源化的凝血酶抗体在制备用于治疗凝血酶介导的疾病或病症的药物中的用途。

技术领域

本发明涉及凝血酶抗体以及其抗原结合片段，进一步地，本发明涉及包含所述凝血酶抗体CDR区的嵌合抗体、人源化抗体，本发明还涉及包含所述凝血酶抗体及其抗原结合片段的药物组合物，以及其作为抗凝药物的用途。

背景技术

血液凝固是防止受损血管出血(止血)的重要过程。然而，阻塞血液流经血管(血栓形成)或脱落后沉积在体内其它部位的血管(血栓栓塞)的血凝块对健康是严重的威胁。血栓症(如急性心肌梗塞(AMI)、静脉血栓塞等)是一类严重危及人类健康及生命的心血管疾病。世界卫生组织2008年统计，到目前，心血管发病及死亡率已经跃居第一位。世界每年心血管病死亡人数约1733万人，占死亡总数30％，中国心血管患者2.9亿人，每年死亡约350万人，占总死亡原因41％。2010年全球疾病负担研究(GBD)统计，中风是我国居民第一大死因。所以近年来，研究有效的治疗心血管疾病的药物及方法引起了人们越来越多的关注。目前，一些抗凝血疗法可以治疗病理学血液凝固，例如使用传统药物肝素、小分子肝素或华法林，或者使用直接凝血酶抑制剂达比加群酯(Dabigatran)等。这些疗法的普遍缺陷是增加出血风险。许多抗凝药物起效剂量(阻止血栓形成)和安全剂量(最高无出血风险)之间的窗口不够大，考虑到个体病人的反应差异，该窗口将进一步缩小。以凝血酶为靶点，用凝血酶拮抗剂来抑制血栓的生成即是临床治疗血栓的方法之一。

凝血反应是一个复杂的信号级联过程，凝血酶(Thrombin)在其中占有核心地位。凝血酶将循环系统的纤维蛋白原分解为纤维蛋白单体(可聚合形成纤维蛋白，血液凝块的纤维基质)，对细胞也有很多直接调控。作为一种丝氨酸蛋白酶，它触发血小板发生形变，释放血小板活化剂ADP、血清素和血栓烷A2，以及趋化因子和生长因子。除此以外，还促进粘附分子P-选择素和CD40配体迁移到血小板表面，进而激活整合素aIIb/b3。后者结合纤维蛋白原和血管性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)，进而介导血小板的聚集。凝血酶还刺激血小板表面的促凝血活性，反过来促进凝血酶的表达。在内皮细胞的培养中，凝血酶促进vWF的释放，细胞质膜的P-选择素的出现和趋化因子的产生。这些反应被认为触发体内血小板和白细胞与内皮细胞表面的结合。内皮细胞随即改变形状，内皮细胞层通透性增加。这些反应被预计将促进血浆蛋白的局部渗出，促进水肿。在非内皮组织中，凝血酶通过作用于平滑肌细胞引起血管收缩。在成纤维细胞或血管平滑肌细胞的体外培养中，凝血酶调节细胞因子的产生并促进有丝分裂，在T淋巴细胞中它触发钙信号和其他的反应。这些细胞反应表明凝血酶将组织损伤与止血过程、炎症反应、甚至加强免疫应答的机体调控关联在了一起。这些细胞反应也提出了一种可能性：除了组织受损外，内皮细胞和其他类型细胞的凝血酶可能在白细胞外渗，血管重塑和/或血管生成中也扮演了一定的角色。因此，凝血酶成为了一个极具潜力的，新的抗凝血抗栓靶标。

目前还没有抗凝血酶抗体药物上市或进入临床，相关的抗体专利有WO2013123591、WO2013088164、WO2014153195、WO2014202992和WO2014202993。本发明提供一种亲和力高，对血栓生成具有显著抑制活性的新型凝血酶抗体。

发明内容

本发明提供一种凝血酶抗体或其抗原结合片段，其包含1个或多个选自以下的CDR区序列或与其具有至少95％序列同一性的氨基酸序列：抗体重链可变区HCDR区序列：SEQID NO:7，SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:9；和抗体轻链可变区LCDR区序列：SEQ ID NO:10，SEQID NO:11和SEQ ID NO:12。