[发明专利]用于检测斯氏弓形菌的荧光PCR引物、试剂盒及检测方法在审
| 申请号： | 201710060204.8 | 申请日： | 2017-01-24 |
| 公开（公告）号： | CN106834463A | 公开（公告）日： | 2017-06-13 |
| 发明（设计）人： | 游淑珠;冯家望;王小玉;蔡教英;姚丽锋;丁琦;唐食明;符家忍 | 申请（专利权）人： | 珠海出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司44205 | 代理人： | 俞梁清 |
| 地址： | 519015 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 检测 弓形 荧光 pcr 引物 试剂盒 方法 | ||
【权利要求书】：
1.用于检测斯氏弓形菌的荧光PCR引物及探针，其特征在于，所述引物及探针是根据斯氏弓形菌的23S rRNA基因的特异性序列所设计的。
2.根据权利要求1所述的荧光PCR引物及探针，其特征在于，所述引物及探针的核苷酸序列如下所示：
上游引物：5’-ATGCTCGTCATCGTAGGGTT-3’；
下游引物：5’-AGCGGATTTGCCTACTTAACAAC-3’；
探针：5’-ATCGAGGTCACGGATGGAAGTGT-3’。
3.一种用于检测斯氏弓形菌的试剂盒，其包括权利要求1或2所述的荧光PCR引物及探针。
4.斯氏弓形菌的荧光PCR检测方法，包括如下步骤：
(1)提取样品DNA；
(2)以样品DNA为模板，利用权利要求1或2所述的荧光PCR引物、探针进行荧光PCR扩增；
(3)根据扩增曲线来判断样品中是否含有斯氏弓形菌。
5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，荧光PCR扩增体系中含有以下组分：
6.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，荧光PCR扩增的程序为：95℃预变性5min；95℃变性20s，60℃退火1min，收集荧光，40个循环。
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