[发明专利]一种软骨细胞的增殖培养基及增殖培养方法

权利要求书

1.一种软骨细胞的增殖培养基，其特征在于，包括L-谷氨酰胺、胎牛血清、脯氨酸、非必须氨基酸、鸡胚提取物、青霉素、链霉素和高糖DMEM液体培养基。

2.根据权利要求1所述的增殖培养基，其特征在于，所述增殖培养基中各组分用量为：

3.根据权利要求1或2所述的增殖培养基，其特征在于，所述增殖培养基中各组分用量为：

4.根据权利要求1至3中任一项所述的增殖培养基，其特征在于，所述增殖培养基的pH值为7.2～7.4。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的增殖培养基，其特征在于，所述鸡胚提取物的制备方法为：去除鸡胚中的鸡眼，然后将去除鸡眼的鸡胚进行匀浆，用等体积的DMEM稀释，在15～30℃、10～100rpm/min条件下摇动1～3h，而后转移至-80～-70℃条件下冻存48h以上，解冻后离心，收集上清液，经过滤除菌，得到鸡胚提取物。

6.根据权利要求5所述的增殖培养基，其特征在于，所述过滤除菌之后还包括纯化的步骤。

7.一种软骨细胞的增殖培养方法，其特征在于，采用如权利要求1至6中任一项所述增殖培养基培养软骨细胞。

8.根据权利要求7所述的增殖培养方法，其特征在于，所述增殖培养方法包括：将软骨细胞接种于含5％FBS的高糖DMEM培养基培养1天；然后接种到如权利要求1至6中任一项所述增殖培养基培养3～10天。

9.根据权利要求7或8所述的增殖培养方法，其特征在于，所述软骨细胞的接种密度为(0.3～5)×10⁴个/cm²。

10.根据权利要求7至9中任一项所述的增殖培养方法，其特征在于，所述培养的条件为5％CO₂、37℃。