[发明专利]一种核基质蛋白22的快速检测试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种核基质蛋白22的快速检测试剂盒，其特征在于，由核基质蛋白22单克隆抗体包被的固相载体、辣根过氧化物酶标记核基质蛋白22单克隆抗体、吖啶酯、洗涤液和核基质蛋白22校准品组成；

所述核基质蛋白22单克隆抗体包被的固相载体的制备方法为：

将核基质蛋白22单克隆抗体加入pH为4.2的柠檬酸钠缓冲液中制成包被液，所述核基质蛋白22单克隆抗体的添加量是柠檬酸钠缓冲液体积的0.8-1.2％，将所述包被液加入96孔微孔板中，每孔100μL，放置4℃条件下过夜，甩掉包被液，接着每孔加入300μL封闭液，室温放置3-5h，甩掉封闭液，室温除湿干燥24h，即得；

所述封闭液由以下组分组成：

柠檬酸钠缓冲液30-50g/L、十四烷基三甲基氯化铵12-16g/L、绿原酸2-4g/L、葛根素0.6-1.2g/L、氯化钠4-6g/L和Proclin300 0.1-0.3g/L，余量为水；

所述洗涤液由以下组分组成：

十四烷基三甲基氯化铵12-16g/L、小檗碱1-3g/L、脱氧胆酸钠8-12g/L、氯化钠3-6g/L、氯化钙5-8g/L和Proclin300 0.1-0.3g/L，余量为水。

2.如权利要求1所述的核基质蛋白22的快速检测试剂盒，其特征在于，所述封闭液由以下组分组成：

柠檬酸钠缓冲液45g/L、十四烷基三甲基氯化铵14g/L、绿原酸3g/L、葛根素0.8g/L、氯化钠5g/L和Proclin300 0.2g/L，余量为水。

3.如权利要求1所述的核基质蛋白22的快速检测试剂盒，其特征在于，所述辣根过氧化物酶标记核基质蛋白22单克隆抗体的制备方法为：

取10mg辣根过氧化物酶加1ml水中溶解，混匀4-6min后加浓度为0.08mol/L的NaIO₄水溶液1ml混合，然后置于冰箱内20-30min后，加0.4mol/L的乙二醇溶液0.5ml终止氧化反应，反应20-30min，接着加入21％NaCl溶液0.3ml，再加1.2ml无水乙醇沉淀醛化酶，离心去上清，沉淀酶再用6ml 80％的乙醇溶液浸泡洗涤一次，离心倾去乙醇，沉淀用pH9.6的0.05mol/L碳酸钠缓冲液2ml溶解，然后加入2ml羊抗人IgG，搅拌均匀，置冰箱内过夜，次日取出加10mgNaBH₄混匀，3h后加10mg饱和硫酸铵沉淀酶结合物，离心，去上清，沉淀用50％饱和硫酸铵洗涤一次，离心，再去上清，沉淀用pH9.6的0.05mol/L碳酸钠缓冲液3ml溶解，转入透析袋中用生理盐水透析除盐，上清呈淡棕色即为辣根过氧化物酶标记核基质蛋白22单克隆抗体。

4.如权利要求1所述的核基质蛋白22的快速检测试剂盒，其特征在于，所述吖啶酯的浓度为1-2g/mL。

5.如权利要求1所述的核基质蛋白22的快速检测试剂盒，其特征在于，所述洗涤液由以下组分组成：

十四烷基三甲基氯化铵14g/L、小檗碱2g/L、脱氧胆酸钠10g/L、氯化钠4g/L、氯化钙6g/L和Proclin300 0.2g/L，余量为水。

6.如权利要求1所述的核基质蛋白22的快速检测试剂盒，其特征在于，所述核基质蛋白22校准品以牛血清蛋白为基质，加入核基质蛋白22抗原纯品配制成。

7.如权利要求1-6任一所述的核基质蛋白22的快速检测试剂盒在检测核基质蛋白22中的应用。