[发明专利]一种用于DNA纯化的蛋白质及其编码基因、应用和纯化方法在审
| 申请号: | 201710049710.7 | 申请日: | 2017-01-23 |
| 公开(公告)号: | CN108342384A | 公开(公告)日: | 2018-07-31 |
| 发明(设计)人: | 曾鸣;王小军;张臣良;张婷;唐子执;刘聪;姜长安 | 申请(专利权)人: | 成都分子脉象生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12N15/10;C07K14/00 |
| 代理公司: | 北京弘权知识产权代理事务所(普通合伙) 11363 | 代理人: | 逯长明;许伟群 |
| 地址: | 610015 四川省成都*** | 国省代码: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 蛋白质 核苷酸序列 编码基因 基因工程领域 编码序列 蛋白标签 高效纯化 基因编码 基因 有效地 应用 融合 | ||
1.一种编码用于DNA纯化的蛋白质的基因,所述DNA含有TetO序列,其特征在于:所述基因具有:
(i)序列表中SEQ ID NO.1所述的核苷酸序列;或
(ii)在(i)所述序列的3’端融合了蛋白标签编码序列的核苷酸序列。
2.根据权利要求1所述的基因,其特征在于:(ii)所述的蛋白标签编码序列是编码SNAP、CLIP、Halo或生物素化标签中的任一序列。
3.根据权利要求1所述的基因,其特征在于:(ii)所述的核苷酸序列是序列表中SEQ IDNO.2至SEQ ID NO.5任一所述的核苷酸序列。
4.一种用于DNA纯化的蛋白质,所述DNA含有TetO序列,其特征在于:所述蛋白质具有:
(iii)序列表中SEQ ID NO.6所述的氨基酸序列;或
(iv)在(iii)所述序列的C端融合了蛋白标签序列的氨基酸序列。
5.根据权利要求4所述的蛋白质,其特征在于:(iv)所述的蛋白标签序列是SNAP、CLIP、Halo或生物素化标签中的任一序列。
6.根据权利要求4所述的蛋白质,其特征在于:(iv)所述的氨基酸序列是序列表中SEQID NO.7至SEQ ID NO.10任一所述的氨基酸序列。
7.权利要求1所述的基因在编码用于DNA纯化的蛋白质的应用,其特征在于:所述DNA含有TetO序列。
8.权利要求4-6任一所述的蛋白质在DNA纯化上的应用,其特征在于:所述DNA含有TetO序列。
9.一种DNA的纯化方法,所述DNA含有TetO序列,其特征在于:所述纯化方法包括,
a)将前述权利要求4或6中具有(iv)所述的氨基酸序列的蛋白质与DNA结合获得结合物,将所述结合物吸附到固态介质上,从而将DNA从目标物中分离出来;
b)用四环素或四环素类似物处理结合物,获得从结合物中分离出来的DNA,从而获得纯化后的DNA。
10.根据权利要求9所述的纯化方法,其特征在于:所述四环素类似物是脱水四环素ATc。
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