[发明专利]从食用菌中提取的核苷酸混合物及其制备方法

权利要求书

1.一种从食用菌中提取的核苷酸混合物，其特征在于：所述核苷酸混合物包括以下成分5'-胞苷酸、5'-环腺苷酸、5'-环鸟苷酸、5'-尿苷酸、5'-肌苷酸；所述食用菌中提取的核苷酸混合物的制备方法，包括以下步骤：

1）选取食用菌，用清水洗净，频率为1000-1300MHz的微波干燥16-21min后，粉碎至200-250目，加入食用菌质量1.3-1.6倍的水浸泡4-8h，采用超声波助溶后在回流状态下浸提2-4次，得浸提液；

2）将浸提液超滤后离心得上清液，加入硫酸含量2-3%的硫酸水溶液调节pH值至3.8-4.3后静置20-27h，离心得沉淀物，用84-93%乙醇洗涤后得核酸沉淀物；

3）在核酸沉淀物中加入核酸沉淀物1.5-1.8倍的蒸馏水和0.02-0.05倍的助溶剂，搅拌，加入5'-磷酸二酯酶，酶解3.5-4.8h后高温灭酶，得核苷酸混合物溶液；

4）在核苷酸混合物溶液中加入2-4%浓度的氢氧化钠水溶液调节pH值至9-11，采用阴离子树脂进行纯化，得洗脱液；

5）将洗脱液通过透析袋透析，浓缩，干燥，得核苷酸混合物。

2.根据权利要求2所述的一种从食用菌中提取的核苷酸混合物的制备方法，其特征在于：所述步骤1中食用菌为香菇、猴头菇、平菇、草菇、杏鲍菇中的一种或多种。

3.根据权利要求2所述的一种从食用菌中提取的核苷酸混合物的制备方法，其特征在于：所述步骤1中浸提时每隔20-25min搅拌一次，每次搅拌4-7min。

4.根据权利要求2所述的一种从食用菌中提取的核苷酸混合物的制备方法，其特征在于：所述步骤2中超滤采用膜孔为500-700A°中空纤维超滤膜分离，控制压力为0.3-0.5mPa，温度为20-24℃，膜通量为60～120ml/min。

5.根据权利要求2所述的一种从食用菌中提取的核苷酸混合物的制备方法，其特征在于：所述步骤3中加入5'-磷酸二酯酶的质量百分比为0.7-0.9%，高温灭菌得方式为加温至120-150℃，灭菌时间为14-20min。

6.根据权利要求2所述的一种从食用菌中提取的核苷酸混合物的制备方法，其特征在于：所述步骤4中阴离子树脂进行纯化时先用92-96%的乙醇以1.4-3BV/h的流速洗脱，再用0.2~0.6mol/LHCl以1.4~3BV/h的流速洗脱，最后用0.5~0.8mol/LHCl+1~3％NaCl以1.7~4BV/h的流速洗脱。

7.根据权利要求2所述的一种从食用菌中提取的核苷酸混合物的制备方法，其特征在于：所述步骤4中助溶剂的成分及其重量份为：水杨酸钠4-8份、苯甲酸钠5-10份、乙酰胺1-3份、聚乙烯吡咯烷酮碘0.01-0.03份、二甲基氨基乙醇0.02-0.05份。

8.根据权利要求2所述的一种从食用菌中提取的核苷酸混合物的制备方法，其特征在于：所述步骤5中浓缩至洗脱液体积的5-8%。