[发明专利]一种高菌量乳酸菌制剂及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种高菌量乳酸菌制剂，其特征在于其含有植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌中的至少一种；所述植物乳杆菌含量占总菌数百分比50％～60％；所述嗜酸乳杆菌含量占总菌数百分比40％～50％；总量为100％；

所述植物乳杆菌包括植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)1A07806，保藏编号为CCTCC NO：M2013293；

所述嗜酸乳杆菌包括嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)PL7，保藏编号为CCTCC NO：M2013294。

2.如权利要求1所述一种高菌量乳酸菌制剂的制备方法，其特征在于所述高菌量乳酸菌制剂中，植物乳杆菌发酵液和嗜酸乳杆菌发酵液均按照本领域常规的深层液体发酵培养的方式获得，经过平板活化、一级种子培养、二级种子培养和发酵培养。

3.如权利要求2所述一种高菌量乳酸菌制剂的制备方法，其特征在于所述平板活化、一级种子培养、二级种子培养和发酵培养具体方法为：

植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌的培养：

将出发菌株按平板活化、液体种子、液体发酵的顺序培养，平板和种子培养基为常规MRS培养基；经数学模型优化后，植物乳杆菌发酵培养基的主要组分及其含量如下：糖蜜4％～6％，红糖1％～2％，酵母粉0.02％～0.04％，蛋白胨0.4％～0.6％，KH₂PO₄ 0.15％～0.25％，FeSO₄0.01％～0.02％，MnSO₄0.005％～0.01％，CaCO₃0.3％～0.5％，发酵培养条件为28～37℃，静置培养36～48h，当发酵液pH降至4.7时补加30％NaCO₃及10％CaCO₃混合液，12h后再补加一次，发酵结束后发酵液活菌数≥1.1×10¹⁰CFU/mL；

经数学模型优化后，嗜酸乳杆菌发酵培养基的主要组分及其含量如下：糖蜜3％～5％，红糖2％～3％，酵母粉0.04％～0.06％，蛋白胨0.4％～0.6％，KH₂PO₄ 0.15％～0.3％，FeSO₄0.01％～0.02％，MnSO₄0.005％～0.01％，CaCO₃0.3％～0.5％，发酵培养条件为28～37℃，静置培养36～48h，当发酵液pH降至4.7时补加30％NaCO₃及10％CaCO₃混合液，12h后再补加一次，发酵结束后发酵液活菌数≥10¹⁰CFU/mL。

4.如权利要求1所述一种高菌量乳酸菌制剂的制备方法，其特征在于所述高菌量乳酸菌制剂的存在形式为微生物菌体发酵液或者微生物冻干菌体与固体辅料的混合物。

5.如权利要求4所述一种高菌量乳酸菌制剂的制备方法，其特征在于当所述高菌量乳酸菌制剂的存在形式为微生物菌液时，制备方法如下：

将植物乳杆菌发酵液和嗜酸乳杆菌发酵液混合即可。

6.如权利要求4所述一种高菌量乳酸菌制剂的制备方法，其特征在于当所述高菌量乳酸菌制剂的存在形式为微生物菌粉与固体辅料的混合物时，制备方法如下：将植物乳杆菌发酵液和嗜酸乳杆菌发酵液混合，经过浓缩冻干后作为主要活性成分，再添加固体辅料，制成片剂、散剂、粉剂。

7.如权利要求5所述一种高菌量乳酸菌制剂的制备方法，其特征在于所述混合后加入维生素C、低聚果糖、甘露醇中的至少一种作为保护剂。

8.如权利要求6所述一种高菌量乳酸菌制剂的制备方法，其特征在于所述混合后加入添加剂，所述添加剂选自海藻糖、甘油、淀粉糊精、甘露醇、低聚果糖中的至少一种，所述添加剂的添加量按质量百分比为植物乳杆菌发酵液和嗜酸乳杆菌发酵液的1％～3％，所述固体辅料包括石灰石、硅藻土、沸石粉、活性炭、微量元素中的至少一种。

9.如权利要求1所述高菌量乳酸菌制剂在制备防治对虾病害、对虾生长促进剂、饲料添加剂或水质净化剂中应用。

10.如权利要求9所述应用，其特征在于所述对虾病害包括对虾红腿、烂眼、甲壳溃疡由弧菌引起的病害。